當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>小鼠ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TBMP-4小鼠骨成型蛋白4ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | BMP-4小鼠骨成型蛋白4ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Mouse Bone morphogenetic protein 4, BMP-4 Elisa Kit |
貨號 | FS-M64175 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
染色體相關(guān)蛋白CAP抗體英文全稱Angiotensin converting enzyme inhibitor英文簡稱ACEI 檢測范圍:1097nmol/L-20ng/ml
染色體相關(guān)蛋白2抗體英文全稱Major Histocompatibility Complex, Class II, DR beta 5英文簡稱HLA-DRB5 檢測范圍:1588nmol/L-8ng/mL
染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1抗體英文全稱anthocyanidin英文簡稱ANTH 檢測范圍:3306nmol/L-800ng/ml
染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1/染色體區(qū)域穩(wěn)定必需蛋白抗體英文全稱Deoxyribonuclease英文簡稱DNase 檢測范圍:3453nmol/L-120U/L
染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體英文全稱phosphatidylethanolamine英文簡稱PE 檢測范圍:8227nmol/L-160ng/mL
染色體濃縮調(diào)節(jié)蛋白2抗體英文全稱zonula occluden-1英文簡稱ZO-1 檢測范圍:8110nmol/L-160ng/mL
染色體卷曲螺旋域包含蛋白1抗體英文全稱cystathionine-γ-lyase英文簡稱CSE 檢測范圍:4278nmol/L-8ng/mL
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白1抗體英文全稱carbonic anhydrase Ⅵ英文簡稱Grim19 檢測范圍:1457nmol/L-20ng/mL
Mannitol;D-Mannitol 規(guī)格:>99%,BR 果糖1,6-二磷酯酶抗體
D-Cysteinehydrochloridemonohydrate 規(guī)格:純度大于98%,BR,一水物 核仁纖維蛋白抗體
CalpainInhibitorII(ALLM) 規(guī)格:≥95%,美國進口 成纖維生長因子21抗體
Ethisterone 規(guī)格:>98%,標準品 脂肪結(jié)合蛋白5抗體(上皮型)
Ethisterone 規(guī)格:>98% 脂氧素受體1抗體
D-Cystine 規(guī)格:0.98 半胱氨蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體
DL-Tryptophan 規(guī)格:>98%,BR 纖維蛋白原單克隆抗體
DL-Serine 規(guī)格:>98%,可用于培養(yǎng) 口蹄疫病A型抗體
L-Methionine 規(guī)格:>98%,BR FXYD離子轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子7抗體
蛇床子 The fruits of Cnidium monnieri 規(guī)格:0.5g
益智 Puzzle 規(guī)格:1g
桔梗 Chinese bellflower 規(guī)格:1g
穿山甲 Pangolin 規(guī)格:1g
*味 Lamiophlomis rotata 規(guī)格:1g
香加皮 Cortex Periplocae 規(guī)格:1g
牽牛子 Semen pharbitidis 規(guī)格:1g
蓽茇 Fructus Piperis longi 規(guī)格:1g
珍珠 Pearl 規(guī)格:20mg
委陵菜 Potentilla chinensis 規(guī)格:1g
羅漢果 Momordica grosvenori 規(guī)格:2g
苦參 Sophora flavescens 規(guī)格:1g
BMP-4小鼠骨成型蛋白4ELISA試劑盒實驗原理紅膜相關(guān)蛋白ERMAP抗體Porcine PT (Prothrombin) ELISA Kit
腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1抗體Porcine SNCα (Synuclein Alpha) ELISA Kit
腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1抗體Porcine GSTα4 (Glutathione S Transferase Alpha 4) ELISA Kit
軟骨素蛋白多糖3抗體Porcine S100A6 (S100 Calcium Binding Protein A6) ELISA Kit
染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1抗體Porcine CDK6 (Cyclin Dependent Kinase 6) ELISA Kit
磷化轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體Porcine PP (Pepsin) ELISA Kit
ETS相關(guān)蛋白71抗體Porcine SUMO2 (Small Ubiquitin Related Modifier 2) ELISA Kit
外胚層發(fā)育不良蛋白1抗體Porcine Smad4/MADH4 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 4 ) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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