參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：鼠種特異性基因核酸檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P10236
產(chǎn)品分類：熒光PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
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實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟 
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR：
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此，實(shí)時(shí)熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí)，剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期（對(duì)數(shù)期），此時(shí)微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現(xiàn)性，即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對(duì)數(shù)存在線性關(guān)系，可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知樣品進(jìn)行定量測(cè)定，因此，實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時(shí)熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確，重現(xiàn)性*定量方法，已得到的*，廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究，藥物療效考核、病原體檢測(cè)等諸多領(lǐng)域。
定量PCR方法：
a、競(jìng)爭(zhēng)法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競(jìng)爭(zhēng)性模板。在同一反應(yīng)管中，待測(cè)樣品與競(jìng)爭(zhēng)模板用同一對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增（其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記）。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競(jìng)爭(zhēng)性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段，而待測(cè)模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開，分別測(cè)定熒光強(qiáng)度，根據(jù)已知模板推測(cè)未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物，內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記，下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí)，內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長(zhǎng)度不同，二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來，分別測(cè)定其熒光強(qiáng)度，以內(nèi)標(biāo)為對(duì)照定量待檢測(cè)模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等標(biāo)記引物，擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合，再加入抗di高辛或生物素酶標(biāo)抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn)，若加入內(nèi)標(biāo)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，也可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)目的。
魏登施泰芽孢桿菌纖維素降解菌模式菌株: no造紙廠附近長(zhǎng)期堆積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 28℃

海水芽孢桿菌近海細(xì)菌模式菌株: no沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 28℃

IFFI13038培養(yǎng)基: 0014模式菌株: no種屬: Trichoderma│viride提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 25-28℃

鏈霉菌屬活性物質(zhì)；抗凝血模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0038生長(zhǎng)條件: 28C

油污染土鞘氨醇菌1.海洋石油污染生物修復(fù); 2.生物活性物質(zhì)篩選模式菌株: no水樣/深層海水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 25℃

 -160℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

鮑曼/醋鈣復(fù)合不動(dòng)桿菌生長(zhǎng)條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0051提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法

JCM3170=ATCC27875=CBS420.74=CECT3304=DSM4模式菌株: yes安全等級(jí): 1種屬: Saccharopolyspora│hirsuta subsp. hirsuta甘蔗渣提供形式: 凍干物Type strain, Produces KA-5685 (aminoglycoside anti培養(yǎng)基: 0038

瓦克青霉培養(yǎng)基: 0013模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

ATCCBAA-482=CCM7143=CIP106688=DSM15638=NC模式菌株模式菌株: yes種屬: Lactobacillus│algidus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 0006生長(zhǎng)條件: 20℃

卵形巴貝斯蟲（三門峽株）主要用于免疫疫苗和診斷試劑的研制,教學(xué)標(biāo)本片的制作,用模式蟲種的制備和提供,蟲種的分類鑒定和一些分析檢測(cè)技術(shù)的研究。模式菌株: no血液提供形式: 其他安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 0生長(zhǎng)條件: 37

黃曲霉生長(zhǎng)條件: 28℃培養(yǎng)基: 14提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 定期移植法

 -161℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

ATCC33842培養(yǎng)基: 0223模式菌株: no種屬: Vibrio│harveyi提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 30℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

蘇云金芽孢桿菌生長(zhǎng)條件: 37℃培養(yǎng)基: 33提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法

黑曲霉培養(yǎng)基: 0015檸檬提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

L-Cysteinehydrochloride

MSRV selective supplement MSRV 選擇添加劑 1.09874.0001 MERCK默克 incubation media MSRV selective supplement MSRV 選擇添加劑 1.09874.0001 MERCK默克

改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250g 乳菌飲料中乳菌的菌落計(jì)數(shù)

SD大鼠脂肪間質(zhì)干*培養(yǎng)基SDratadiposemesenchymalstemcellsculturemedium

伊紅美藍(lán)瓊脂(顆粒) 250g 弱選擇性培養(yǎng)基，腸道菌的選擇性分離

三四唑瓊脂基礎(chǔ)  TTC Agar Base  250克  彎曲桿菌的TTC試驗(yàn)

三四唑營(yíng)養(yǎng)瓊脂  TCC Nutrient Agar  250克  細(xì)菌總數(shù)測(cè)定時(shí)防止菌落蔓延

三四唑卵磷脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂  TTC Lecithin Tween 80 Nutrient Agar  250克  化妝品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定

胰蛋白胨大豆卵磷脂聚山梨酯瓊脂  TAT Broth  250克  化妝品微生物檢測(cè)
鼠種特異性基因核酸檢測(cè)試劑盒大腸桿菌噬菌體MS2液體培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于大腸桿菌噬菌體MS2培養(yǎng)

大豆酪蛋白消化物瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：一種通用的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,用于各種微生物的培養(yǎng)

無水葡萄糖規(guī)格：500g用途：微生物指示劑

慶大霉素瓊脂規(guī)格：250g用途：用于霍亂弧菌的分離培養(yǎng)

蛋白胨規(guī)格：250g用途：用于制備0.1%蛋白胨水，用于空腸彎曲菌的預(yù)增菌

馬鈴薯液體培養(yǎng)基（含霉素）規(guī)格：250g用途：用于霉菌和酵母菌增菌培養(yǎng)
PCR的反應(yīng)條件：
因擴(kuò)增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴(kuò)增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴(kuò)增片段的大小，設(shè)定25～30個(gè)循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少，擴(kuò)增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會(huì)出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預(yù)備實(shí)驗(yàn)可2℃間隔進(jìn)行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進(jìn)行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時(shí)，每kbp大體可設(shè)定30秒～1分鐘；當(dāng)溫度設(shè)定在68℃以下時(shí), 時(shí)間設(shè)定可稍長(zhǎng)一些。通常，Anneal溫度太高，有時(shí)會(huì)得不到擴(kuò)增產(chǎn)物；Anneal溫度太低時(shí)，容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外，Extension時(shí)間太短時(shí)，會(huì)得不到擴(kuò)增產(chǎn)物或者會(huì)有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成；而Extension時(shí)間太長(zhǎng)時(shí)，會(huì)出現(xiàn)Smear。