當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T埃可病毒 11 型核酸檢測試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
埃可病毒 11 型核酸檢測試劑盒 | 熒光PCR法 | FS-P9823 |
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Hep3b-Cas9-743形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-IL31RA Polyclonal Antibody
Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Hep3b-Cas9-744形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-CAMK1D Polyclonal Antibody
Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Hep3b-Cas9-745形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-SURF1 Polyclonal Antibody
突變型Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Hep3b-mCas9-746形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-SIRT6 Polyclonal Antibody
突變型Cas9穩(wěn)定表達的人肝腹水腺癌;SK-HEP-1-mCas9-737形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-MCM4 Polyclonal Antibody
突變型Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Hep3b-mCas9-747形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-GRK1 Polyclonal Antibody
突變型Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Hep3b-mCas9-748形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-DDB1 Polyclonal Antibody
突變型Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Hep3b-mCas9-749形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-DLK1 Polyclonal Antibody
突變型Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Hep3b-mCas9-750形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-GFPT1 Polyclonal Antibody
Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Li-7-Cas9-751形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-SMAD2/SMAD3 Polyclonal Antibody
Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Li-7-Cas9-752形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-CCR6 Polyclonal Antibody
Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Li-7-Cas9-753形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-CD26 Polyclonal Antibody
Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Li-7-Cas9-754形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-L1RE1 Polyclonal Antibody
Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Li-7-Cas9-756形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-HRAS Polyclonal Antibody
Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Li-7-Cas9-757形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-Nephrin Polyclonal Antibody
Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌;Li-7-Cas9-758形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-BCL2L15 Polyclonal Antibody
??刹《?/font> 11 型核酸檢測試劑盒犬肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒HSP-90ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒HSP-90ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬組胺(HIS)ELISA試劑盒HSPGELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒HSPgp96ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒HSPgp96ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬白介素18(IL-18)ELISA試劑盒HSPgp96ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒HSPgp96ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬2,3-二磷甘油(2,3-DPG)ELISA試劑盒HSPgp96ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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