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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TCH50大鼠血清總補(bǔ)體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
SS大鼠生長(zhǎng)抑素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
β-EP大鼠β內(nèi)啡肽ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
MTL大鼠胃動(dòng)素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
CA大鼠碳酸酐酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
EL大鼠內(nèi)皮脂肪酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | CH50大鼠血清總補(bǔ)體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Rat 50% complement hemolysis, CH50 Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-R64517 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
Complexin I/復(fù)合素1抗體英文全稱Megalin英文簡(jiǎn)稱Megalin檢測(cè)范圍2276nmol/L-
CD30抗體英文全稱snail homolog 2英文簡(jiǎn)稱SNAI2檢測(cè)范圍2277nmol/L-2000pg/ml
細(xì)胞角蛋白19,17,14,42,10抗體英文全稱snail homolog 1英文簡(jiǎn)稱SNAI1檢測(cè)范圍2278nmol/L-2000pg/ml
細(xì)胞角蛋白10抗體英文全稱Topoisomerase Ⅱa英文簡(jiǎn)稱TOP2a檢測(cè)范圍2279nmol/L-2000pg/mL
細(xì)胞角蛋白5抗體英文全稱17 beta hydroxy steroid dehydrogenase 4英文簡(jiǎn)稱17βHSD4檢測(cè)范圍2280nmol/L-8ng/mL
補(bǔ)體C9a抗體英文全稱gamma glutamyl transpeptidase 7英文簡(jiǎn)稱gGT7檢測(cè)范圍2281nmol/L-2000pg/mL
20號(hào)染色體開放閱讀框141抗體英文全稱C-Mer Proto Oncogene Tyrosine Kinase英文簡(jiǎn)稱MERTK;Mer檢測(cè)范圍2282nmol/L-20ng/mL
20號(hào)染色體開放閱讀框160抗體英文全稱Sphingosine 1 Phosphate Receptor 1英文簡(jiǎn)稱S1PR1檢測(cè)范圍2283nmol/L-80ng/mL
親環(huán)蛋白(親環(huán)素)40抗體英文全稱Sphingosine 1 Phosphate Receptor 2英文簡(jiǎn)稱S1PR2檢測(cè)范圍2284nmol/L-60ng/mL
21號(hào)染色體開放閱讀框56抗體英文全稱Sphingosine 1 Phosphate Receptor 3英文簡(jiǎn)稱S1PR3檢測(cè)范圍2285nmol/L-20ng/mL
中性粒細(xì)胞殺菌蛋白BP30抗體英文全稱Proteinase-3英文簡(jiǎn)稱PRTN3檢測(cè)范圍2286nmol/L-40U/ml
Cappuccino蛋白抗體英文全稱Fumarate hydratase, mitochondrial英文簡(jiǎn)稱FH檢測(cè)范圍2287nmol/L-2000pg/mL
前列腺素過氧化物合成酶3抗體英文全稱phospho-Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1英文簡(jiǎn)稱p-VEGFR1檢測(cè)范圍2288nmol/L-20ng/mL
補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1抗體英文全稱Opacity-associatedproteins英文簡(jiǎn)稱OPAs檢測(cè)范圍2289nmol/L-40ng/mL
羧肽酶CPN2抗體英文全稱valosin-containing protein英文簡(jiǎn)稱VCP檢測(cè)范圍2290nmol/L-1500pg/ml
鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2D(CaMKIIδ)英文全稱anti-gliadin IgA antibody英文簡(jiǎn)稱AGA-IgA檢測(cè)范圍2291nmol/L-100ng/mL
兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb20 ul
兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb500 ul
兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒 SimpleChIP® Human β-Actin 3' UTR Primers100 ul
兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒Toll-like Receptor 9 (D9M9H) XP® Rabbit mAb20 ul
兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒Toll-like Receptor 9 (D9M9H) XP® Rabbit mAb100 ul
兔p53(p53)ELISA試劑盒 BIN1 Antibody100 ul
兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒NF-κB1 p105/p50 (5D10D11) Mouse mAb100 ul
兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒PD-L1 (E1L3N®) XP® Rabbit mAb20 ul
CH50大鼠血清總補(bǔ)體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理G蛋白偶聯(lián)受體G2A抗體α-Lipoic acid別名: Thioctic acid分子式: C8H14O2S2性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
G蛋白偶聯(lián)受體1抗體Dihydrosenkyunolide C別名: 分子式: C12H14O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
G蛋白偶聯(lián)受體100抗體Glyceryl hexacosanoa別名: 分子式: C29H58O4性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
G蛋白偶聯(lián)受體101抗體Digalactosyldiacylglycerol別名: DGDG分子式: C49H88O15性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
G蛋白偶聯(lián)受體103抗體Corollin別名: 分子式: C15H21N3O15性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
G蛋白偶聯(lián)受體110抗體3-Nitropropionic acid別名: 3-Nitropropanoic acid; Hiptagenic acid分子式: C3H5NO4性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
G蛋白偶聯(lián)受體12抗體Senkyunolide G別名: 分子式: C12H16O3性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物/G蛋白偶聯(lián)受體124抗體4-O-(3-nitropropanoyl)corollin別名: 分子式: C18H24N4O18性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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