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貨號 | FS-01S63434 |
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產(chǎn)品名稱:ATP含量檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/48樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63434
商品介紹:
測定意義 ATP廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測定ATP含量并且計算能荷,能夠反映能量代謝狀態(tài)。 測定原理: 肌酸激酶催化肌酸和ATP反應(yīng)生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷鉬酸比色法檢測磷酸肌酸含量,以此反應(yīng)ATP含量。 自備儀器和用品: 分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
兔β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)試劑盒Anti-AHR Antibody配對盒基因9抗體
兔髓分化因子88(MYD88)試劑盒Anti-AHR AntibodyP-鈣粘附分子抗體
兔球蛋白G2(IgG2)試劑盒Anti-AHSA1 Antibody腺苷環(huán)化激活肽-38抗體
兔神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG-2)試劑盒Anti-AHR Antibody腫瘤抑制基因P53蛋白抗體(野生型P53)
兔核孔蛋白214kda(NUP214)試劑盒Anti-AIF1 Antibody腫瘤抑制基因p63α抗體
兔成纖維生長因子21(FGF21)試劑盒Anti-AHSG Antibody磷二酯4A8抗體
兔血管緊張肽A(ATA)試劑盒 Anti-AHSG Antibody血小板源性生長因子AB+BB抗體
兔成纖維生長因子受體2(FGFR2)試劑盒 Anti-AHSG Antibody增殖核抗原抗體
兔粘蛋白13(MUC13)試劑盒Anti-AICDA Antibody腦特異性多肽蛋白19抗體
兔甲胎蛋白(αFP)試劑盒 Anti-AIFM1 Antibody三磷腺苷門控陽離子通道蛋白抗體
兔血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)試劑盒Anti-AIFM1 Antibody硫氧還蛋白過氧化物Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體
兔胸苷合成(TS/TYMS)試劑盒Anti-AIFM1 Antibody(PB0388)p53凋亡相關(guān)作用蛋白PMP22抗體
兔II型前膠原羧基端原肽(PIICP)試劑盒Anti-AIMP2 Antibody磷核糖咪唑羧化抗體
兔甘露糖結(jié)合蛋白(MBP/MBL)試劑盒 Anti-AIM2 Antibody(PB0721)神經(jīng)生長因子受體抗體
兔抗生長抗體(GHAb)試劑盒 Anti-AIP Antibody腫瘤錯配修復(fù)基因PMS1抗體
ATP含量檢測試劑盒微量法支鏈基轉(zhuǎn)2抗體Human GSG1L ELISA Kit人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員12(EAR12)ELISA試劑盒,EAR12 ELIS
BCL2相關(guān)蛋白A1抗體Human GSPT2 ELISA Kit人干擾活化基因205(Ifi205)ELISA試劑盒,
B瘤蛋白3抗體Human GPRIN3 ELISA Kit人蛋白磷1調(diào)控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒,
轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體Human GPS2 ELISA Kit人可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒,
防御β1/Defensin β1抗體Human GPSM2 ELISA Kit人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISA試劑盒,
B活化因子受體抗體Human GPX4 ELISA Kit人功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)ELISA試劑盒,
TNF家族B激活因子抗體Human GPX7 ELISA Kit人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒,
蛇巴曲抗體Human GPX5 ELISA Kit人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒,
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