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ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | BMP-2小鼠骨成型蛋白2ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Mouse Bone morphogenetic protein 2, BMP-2 Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-M64182 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
防御素β2(DEFβ2) 規(guī)格:100mg 英文:CCNM3
防御素β2(DEFβ2) 規(guī)格:1g 英文:CCNM2
防御素β2(DEFβ2) 規(guī)格:100mg 英文:CCNM1
防御素β2(DEFβ2) 規(guī)格:100mg 英文:CCNL2
紅生成素(EPO) 規(guī)格:100mg 英文:CCNL1
紅生成素(EPO) 規(guī)格:0.5g 英文:CCNK
紅生成素(EPO) 規(guī)格:5g 英文:CCNJ
紅生成素(EPO) 規(guī)格:10mg/支 英文:CCNI2
紅生成素(EPO) 規(guī)格:100mg 英文:CCNI
紅生成素(EPO) 規(guī)格:1g 英文:CCNH
紅生成素(EPO) 規(guī)格:100mg 英文:CCNG2
紅生成素(EPO) 規(guī)格:100mg 英文:CCNG
紅生成素受體(EPOR) 規(guī)格:20mg 英文:CCNF
紅生成素受體(EPOR) 規(guī)格:1ml 英文:CCNE2
紅生成素受體(EPOR) 規(guī)格:50mg 英文:CCNE
Marmin聚乙二醇6000 分子式:C27H30O14 性狀:Yellow powder 純度:97.5%
6',7'-Dihydroxybergamottin吐溫20 分子式:C19H14O7 性狀:Brown powder 純度:%
Marmin acetonide曲拉通X-100 分子式:C20H18O11 性狀:Yellow powder 純度:98.0%
6',7'-Dihydroxybergamottin acetonide胰蛋白胨 分子式:C17H14O8 性狀:Yellow powder 純度:98.0%
Auraptenol生物素;D-生物素;維生素 H 輔酶 R 分子式:C19H20O7 純度:%
Rutaretin甘油 分子式:C17H14O6 性狀:Yellow powder 純度:99.0%
12-Oxocalanolide A檸檬鈉二水;檸檬三鈉二水 分子式:C20H18O5 純度:99.0%
Isoscopoletin明膠 分子式:C17H16O6 純度:%
cis-DehydroostholBacto酵母浸(BD原裝) 分子式:C15H10O4 純度:99.0%
4-氨基-6--1,3-苯基二硫酰胺( 4- amino -6- chloro -1, 3- phenyl amide (two sulfur 規(guī)格:50mg
氫溴力克拉敏 EPI galanthamine hydrobromide 規(guī)格:50mg
噻嗪 Hydrochlorothiazide 規(guī)格:50mg
Cortisone 規(guī)格:50mg
二甘醇 Two glycol 規(guī)格:100mg
1,3-丙二醇 1, 3- propylene glycol 規(guī)格:100mg
2-巰基 2- mercapto 規(guī)格:30mg
氨基三乙 Amino three acetic acid 規(guī)格:50mg
非諾貝特雜質(zhì)Ⅱ Fenofibrate impurity II 規(guī)格:50mg
非諾貝特雜質(zhì)Ⅰ Fenofibrate impurity I 規(guī)格:50mg
重酒石腎上腺素 Epinephrine bitartrate 規(guī)格:100mg
環(huán)扁桃酯 Cyclandelate 規(guī)格:100mg
BMP-2小鼠骨成型蛋白2ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理FBXO36 F-box蛋白相關(guān)蛋白36抗體Porcine RBP4 (Retinol Binding Protein 4, Plasma) ELISA Kit
T1蛋白抗體Porcine TPPP (Tubulin Polymerization Promoting Protein) ELISA Kit
RAB6蛋白抗體Porcine TXLNa (Taxilin Alpha ) ELISA Kit
皮卡丘素抗體Porcine MMP-13 (Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit
ELAVL4蛋白抗體Porcine CCK-33 (Cholecystokinin 33) ELISA Kit
表皮生長因子樣激素受體1Porcine CCK-39 (Cholecystokinin 39) ELISA Kit
磷化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體Porcine CCK-58 (Cholecystokinin 58) ELISA Kit
電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白α抗體Porcine ACCPA (anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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