當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>抑制劑激活劑>> CYP17抑制劑
貨號(hào) | FS-X10369 |
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中文名稱:CYP17抑制劑
英文名稱:Abiraterone acetate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg|1g|2g|5g
貨號(hào):FS-X10369
產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Abiraterone acetate 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg|1g|2g|5g Abiraterone acetate是一種有效的選擇性的不可逆的CYP17抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):154229-18-2 別名:CB7630 純度:99.92% 分子量:391.55 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
異常漢遜酵母異常變種一氧化氮合成-3(內(nèi)皮型)抗體Human CNTF(Ciliary neurotrophic factor) 膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)
白金針14孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體Human FGF1(Heparin-binding growth factor 1) 膠原凝集(Collectin)
異常漢遜酵母鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體Human FLT3(Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3) 膠原II(Collagenase II)
相思根瘤菌P物質(zhì)受體抗體Human IFNA1(Interferon alpha-1/13) 膠原I(Collagenase I)
蘇云金芽胞桿菌神經(jīng)激肽B受體抗體Human 5-NT(5-Nucleotidase) 膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)
雞傷門氏菌腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體Human AAA(Anti-Albumin Antibody) 膠原吡啶交聯(lián)(PYD)
污黑腐皮殼腫瘤抑制基因抗體Human ABCC5(ATP Binding Cassette Transporter C5) 降脂(Adipsin)
棉子糖乳球菌腫瘤抑制基因抗體Human ABCG1(ATP Binding Cassette Transporter G1) 降解加速因子(DAF)
產(chǎn)克雷伯氏菌孤菲肽/痛敏肽抗體Human AAHA(Anti-Apolipoprotein Antibody) 降鈣原(PCT)
紫色紅曲軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體Human ACA-IgG(Anti-Cardiolipin Antibody IgG) 降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)
玉黑粉菌神經(jīng)元引導(dǎo)蛋白3抗體Human ACAT2(Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2, cytosolic) 降鈣(CT)
釀酒酵母性受體NK-p46抗體Human ACHAP(Acetylcholinesterase Associated Protein) 堿性胎兒蛋白(BFP)
鐮刀菌屬神經(jīng)組織特異性F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白2抗體Human ACC(Acetyl-CoA Carboxylase) 堿性磷(ALP)
枯草芽孢桿菌NYS48蛋白抗體Human IFNA1(Interferon alpha-1/13) 堿性亮拉鏈轉(zhuǎn)錄因子ATF樣蛋白(BATF)
杏鮑菇肌痙攣性癲癇病相關(guān)EPM2蛋白抗體Human FGF1(Heparin-binding growth factor 1) 堿性成纖維生長因子9(bFGF-9)
靈芝非霍奇金淋巴瘤重復(fù)蛋白2抗體Human ANXA5(Annexin A5) 堿性成纖維生長因子6(bFGF-6)
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:>90%,羅氏分包黃芪皂II
產(chǎn)紫青霉Penicillium│purpurogenum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR黃芪皂I
秦氏蜜環(huán)菌Armillaria│qinii H.C. Wang & J. Zhao 質(zhì)量規(guī)格:30 units/mg黃芪
CYP17抑制劑蘑菇 D-高絲維生B12
小單孢 2-硝基間苯二維生D受體
異配囊接霉 阿脲 四水合物維生K2
戴爾根霉 代十六烷基吡啶一水合物尾加壓II
魯考弗美奇酵母 二叔丁基膦胃腸癌標(biāo)志物CA199
凝結(jié)芽孢桿 二對甲苯酰硫胃蛋白
皺環(huán)球蓋菇 2-溴-3-氟甲苯胃蛋白原Ⅰ
栗色鏈霉 氘代三胃蛋白原Ⅱ
禽腦脊髓炎病 N-甲酰-L-甲硫氨酰-L-白氨酰-L苯胃蛋白原A
栗酒裂殖酵母 碳鉛胃動(dòng)
枯草芽孢桿 [1,3-雙(二苯膦基)烷]二化鈀胃饑餓
近緣毛殼 2′,3′-二脫氧尿胃泌
貪銅(加詞待譯) 仲丁基鋰胃泌釋放肽
大腸埃希 N-乙酰-D-脯無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員10B
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