當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96T整合素α2β1ELISA試劑盒
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
整合素α2β1ELISA試劑盒 | ITG α2β1 | FS-P66132 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
膜相關(guān)環(huán)指蛋白10抗體USF-1(upstream stimulatory factor 1) 上游激因子1抗原五味子(標(biāo)準(zhǔn)品)
粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體Ubiquitin 泛素蛋白抗原五味子乙(標(biāo)準(zhǔn)品)
粘膜血管定居因子抗體VASH1(Vasohibin 1) 兔抗血管抑制蛋白1抗原五味子素(標(biāo)準(zhǔn)品)
抑癌因抗體VCAM-1/CD106(Vascular cell adhesion molecule 1 isoform b precusor; CD106 antigen) 血管內(nèi)皮粘附分子抗原五味子乙素(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)上皮酪氨激酶/癌激酶10抗體VCAM-1/CD106 (Vascuolar cell adhesion molecule 1) 血管內(nèi)皮粘附分子抗原五味子酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物MHCIa抗體VDAC peptide 電壓依賴性陰離子通道抗原西貝母堿(標(biāo)準(zhǔn)品)
中腦核仁蛋白抗體VEGF 血管內(nèi)皮生長因子(多肽抗原)西紅花苷,α-藏花素(標(biāo)準(zhǔn)品)
巨噬移動抑制因子抗體VEGF-A(Vascuoar endothelial growth factor A) 血管內(nèi)皮生長因子A抗原西紅花苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)
巨噬炎癥因子1α抗體 MIP-1αVEGF-C(Vascuoar endothelial growth factor-C) 血管內(nèi)皮生長因子C型抗原西紅花苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)
蕈堿型乙酰膽堿受體M1抗體VEGFR2/VEGF-R2/Flk1 (Vascular Epidemal growth factor receptor-2) 血管內(nèi)皮生長因子受體2抗原細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體sVEGFR2/sFLK-1(truncated soluble vascular endothelial growth factor receptor 2)human 可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2抗原(人)仙鶴草酚B(標(biāo)準(zhǔn)品)
絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體VEGFR-3/FLt-4 血管內(nèi)皮生長因子受體-3(多肽)血根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)
絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體VEGFR-3(Vascular Epidemal growth factor receptor-3) 血管內(nèi)皮生長因子受體-3抗原香草(標(biāo)準(zhǔn)品)
蛋白裂解酶(一種新的癌因)抗體VWF (Von Willebrand Factor) 血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗原香草
髓鞘堿性蛋白/磷脂堿性蛋白抗體Wnt1 信號通路Wnt1抗原香蒲新苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
整合素α2β1ELISA試劑盒Anti-PPBP Antibody詹氏桿菌拉丁屬名: Propionibacterium jensenii
Anti-PPIA Antibody非無菌藥品 需氧菌總數(shù) 拉丁屬名: 非無菌藥品 需氧菌總數(shù)
Anti-PPIB Antibody釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Anti-PPID AntibodyMaribius salinus拉丁屬名: Maribius salinus
Anti-PPID Antibody雞傷寒沙門氏菌拉丁屬名: gallinarum
Anti-PPIB Antibody大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
Anti-PPID Antibody釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Anti-PPIG Antibody斯托克青霉拉丁屬名: Penicillium stolkiae
Anti-PPL Antibody雙歧雙歧桿菌拉丁屬名: Bifidobacterium bifidum
Anti-PPM1A Antibody梅氏弧菌拉丁屬名: Vibrio metschnikovii
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