產(chǎn)品介紹:

中文名稱：Pim1/AKK1/MST2/LKB1抑制劑

英文名稱：Pim1/AKK1-IN-1

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

貨號(hào)：FS-X10625

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

缺陷短波單胞菌Cy5.5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOCS3 Antibody過氧化7(GPX7)

球毛殼菌Cy7標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOCS4 Antibody過氧化5(GPX5)

肉色諾卡氏菌PE標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOCS3 Antibody過氧化4(GPX4)

大奇異球菌PE-Cy3標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOCS5 Antibody過氧化1(GPX1)

枯草芽孢桿菌PE-CY5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD1 AntibodyS轉(zhuǎn)移ω1(GSTω1)

雙孢鐮孢APC標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD2 AntibodyS轉(zhuǎn)移π1(GSTπ1)

林肯鏈霉菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD1 AntibodyS轉(zhuǎn)移μ2(GSTμ2)

毛頭鬼傘Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD2 Antibody(PB0454)S轉(zhuǎn)移κ1(GSTκ1)

牛奶  三聚Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD3 AntibodyS轉(zhuǎn)移θ2(GSTθ2)

新城疫病Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD3 AntibodyS轉(zhuǎn)移θ1(GSTθ1)

地下諾爾氏菌PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD3 AntibodyS轉(zhuǎn)移α5(GSTα5)

戊糖乳桿菌PE-Cy7標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SORBS1 AntibodyS轉(zhuǎn)移α4(GSTα4)

根瘤菌羅丹明標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-Sorbitol Dehydrogenase/SORD AntibodyS轉(zhuǎn)移α2(GSTα2)

人參地土地桿菌FITC標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SORBS3 AntibodyS轉(zhuǎn)移α1(GSTα1)

食砜節(jié)桿菌膠體金標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOX11 Antibody谷光甘肽合成(GSS)

芭蕉生粘鞭霉堿性磷（AP）標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOX1 Antibody谷轉(zhuǎn)2(ALT2)

生長抑制蛋白NDN抗體煙色紅曲霉大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物

鈉離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體溝鯰愛德華氏菌大鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞提取物

神經(jīng)內(nèi)分泌特異性蛋白2抗體變異庫克菌大鼠角膜成纖維細(xì)胞提取物

神經(jīng)生長因子受體相關(guān)蛋白1抗體金灰青霉大鼠角膜上皮細(xì)胞提取物
Pim1/AKK1/MST2/LKB1抑制劑尼氏芽孢桿 馬心脂肪結(jié)合蛋白

樹舌4-1 酐馬結(jié)合珠蛋白；觸珠蛋白

產(chǎn)二鏈霉 4,4′,4″-三叔丁基-2,2′:6′,2″-三聯(lián)吡啶輔肌動(dòng)蛋白α1

地衣芽孢桿 2-氟-4-三氟甲輔肌動(dòng)蛋白α2

辣椒溶桿 2,5-二氟-4-(三氟甲基)苯轉(zhuǎn)錄激活因子-1

普通變形桿 D-3-轉(zhuǎn)錄激活因子-2

栗疫 L-4-三氟磷脂酰肌蛋白聚糖1

膠孢 BOC-D-3-磷脂酰肌蛋白聚糖4

Sphingobium francense BOC-D-3,4-二苯絡(luò)絲蛋白

奇異酵母 BOC-L-3-緊密連接蛋白

瘤孢梭孢殼 BOC-L-2-苯組織因子

長枝木霉 BOC-L-2-氟苯組織因子途徑抑制物

蠟葉曲霉 2-羥基-2-(三氟甲基)激錨定蛋白1

南方樹舌 (R)-(-)-1-苯甲基-3-氨基吡咯烷增殖誘導(dǎo)配體

深褐褶 (1S,2R)-2-(二丁氨基)-1-苯基-1-αL艾杜糖