當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T正常T細胞表達和分泌因子撫生ELISA試劑盒
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
正常T細胞表達和分泌因子撫生ELISA試劑盒 | regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted | FS-P66135 |
公司產(chǎn)品僅用于科研ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
錯配修復蛋白2抗體CD56/NCAM1 (Neural Cell Adhesion Molecule 1) 神經(jīng)粘附分子1(抗原)鹽甜菜堿(標準品)
5胞嘧啶抗體CEAcam8/CD67 (carcinoembryonic Anti-gen-related cell adhesion molecule 8) 癌胚抗原相關(guān)粘附分子8(抗原)鹽小檗(標準品)
T淋巴分化蛋白MAL2抗體CD68 CD68抗原鹽益母草堿(標準品)
環(huán)指蛋白61抗體CD68 CD68(多肽抗原)楊梅苷(標準品)
蕈堿型乙酰膽堿受體M3抗體CD117/c-kit/SCFR 干生長因子受體/表面分化抗原(抗原)楊芽黃素(標準品)
錯配修復蛋白1抗體CD133 Anti-gen 造血干抗原(多肽抗原)洋川芎內(nèi)酯A(標準品)
血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) CD147(抗原)氧化槐果堿(標準品)
巨噬清道夫受體抗體CD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原Belinostat
生肌調(diào)節(jié)因子6抗體CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B 和 T 淋巴衰減蛋白(抗原)氧化前胡素(標準品)
化CpG結(jié)合蛋白抗體CDK2 (Cyclin-Dependent Kinase 2) 周期素依賴激酶2(抗原)野百合堿(標準品)
單克隆抗體CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依賴性激酶4(抗原)野黃芩苷(標準品)
單克隆抗體CEA (Carcinoembryonic Anti-gen ) 人癌胚抗原(抗原)野黃芩素(標準品)
GTP結(jié)合蛋白MAS1抗體ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 蕈堿型乙酰膽堿受體M2(抗原)8-O-乙酰山梔苷酯(標準品)
髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體Connexin-43(Cx43) 間隙連接蛋白43(多肽片斷抗原)乙酰紫堇靈(標準品)
黑色素瘤相關(guān)抗原抗體Connexin-45(CX45) 間隙連接蛋白45(抗原)異阿魏(標準品)
正常T細胞表達和分泌因子撫生ELISA試劑盒Anti-PRDX3 Antibody(0349)紙葡萄穗霉拉丁屬名: Stachybotrys chartarum
Anti-PRDX5 Antibody米曲霉拉丁屬名: Aspergillus oryzae
Anti-PRDX5 Antibody(B0417)美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Monilinia fructicola
Anti-PRF1 Antibody短桿狀馬賽菌拉丁屬名: Massilia brevitalea
Anti-PRDX6 Antibody(350)南非諾卡氏菌拉丁屬名: Nocardia transvalensis
Anti-PRG2 Antibody乳球菌屬拉丁屬名: Lactococcus sp.
Anti-PREB Antibody擬無枝菌拉丁屬名: Amycolatopsis sp.
Anti-PRKAB1 Antibody泡盛曲霉拉丁屬名: Aspergillus awamori
Anti-PRKAA1 Antibody黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
Anti-PRKAB2 Antibody熒光假單胞菌用途: 分類、研究,具有處理養(yǎng)殖廢水潛力。
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