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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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Akt活化抑制劑(Honokiol)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-18 15:55:05瀏覽次數(shù):197次

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貨號 FS-X10536
Akt活化抑制劑(Honokiol)正在熱銷的產(chǎn)品:ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發(fā)育不良抗原十四烷 98%
rhEGF(rh-Epidermal growth factor) 人表皮生長因子1-正己烷 99%
EGF(Epidermal growth factor)rat 表皮生長因子抗原(大鼠)正丁烷 CP,98%
EGFL7(EGF-like

產(chǎn)品介紹:

Honokiol是Akt抑制劑,能夠抑制Akt的活化,同時(shí)能夠增強(qiáng)ERK1/2的磷酸化。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:35354-74-6

別名:NSC 293100

純度:99.71%

分子量:266.33

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

中文名稱:Akt活化抑制劑(Honokiol)

英文名稱:Honokiol

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg

貨號:FS-X10536

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

不動(dòng)桿菌馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體Anti-KLF8 Antibody視黃脫氫12(RDH12)

蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種磷化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體Anti-KLF5 Antibody視黃脫氫11(RDH11)

變形假單胞菌磷化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體Anti-KLF6 Antibody視黃脫氫10(RDH10)

異常漢遜酵母磷化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體Anti-KLK1 Antibody視黃結(jié)合蛋白3(RBP3)

圓錐節(jié)叢孢磷化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體Anti-KLK1 Antibody視黃結(jié)合蛋白1(RBP1)

鏈狀鐮孢磷化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體Anti-KLK1 Antibody視黃飽和(RETSAT)

木糖葡糖醋桿菌磷化微管相關(guān)蛋白抗體Anti-KLK1 Antibody視蛋白5(OPN5)

光帽鱗傘(滑菇)非受體型酪蛋白激Tnk1抗體Anti-KLK1 Antibody視蛋白4(OPN4)

大腸埃希氏菌磷化非受體型酪蛋白激Tnk1抗體Anti-KLK10 Antibody視蛋白3(OPN3)

黏液桿菌磷化DNA拓普西異構(gòu)Ⅱ抗體Anti-KLK1 Antibody矢車菊δ3(CENTδ3)

禿裸鏈霉菌環(huán)腺應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體Anti-KLK2 Antibody矢車菊δ2(CENTδ2)

水質(zhì)糞大腸菌群質(zhì)控樣品(多管發(fā)酵法)磷化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體Anti-KLK3 Antibody矢車菊δ1(CENTδ1)

*蜜環(huán)菌CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體Anti-KLK2 Antibody矢車菊γ3(CENTγ3)

鏈霉菌腫瘤壞死因子β抗體(TNFβ)Anti-KLK11 Antibody矢車菊γ2(CENTγ2)

芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體Anti-KLK4 Antibody矢車菊γ1(CENTγ1)

茯苓血栓B2(一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因)抗體Anti-KLK8 Antibody矢車菊β6(CENTβ6)

抑制Hh信號通路蛋白SUFU抗體流感嗜血桿菌大鼠肺成纖維細(xì)胞

脫髓鞘相關(guān)蛋白SH3TC2N抗體嗜根考克氏菌大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞

富含脯突觸相關(guān)蛋白SHANK2抗體大腸埃希氏菌O157大鼠小腸上皮細(xì)胞

線性泛鏈相關(guān)蛋白SHARPIN抗體哈維氏弧菌大鼠直腸平滑肌細(xì)胞
Akt活化抑制劑(Honokiol)淡黃青霉 1--2-硅基乙炔胰島

槐栓 對氨基叔丁酯胰島生長因子1

枯草芽胞桿 2--4-(三氟甲基)苯甲胰高血糖

芽孢桿 (11R,12R)-9,10-二氫-9,10-乙撐蒽-11,12-二游離脂肪

維多利亞維希尼克氏酵母 4-溴-N-Boc-誘導(dǎo)型NO合

微小鏈霉 N-Fmoc-N'-三苯甲基-D-天冬酰孕酮

細(xì)小磚紅鐮孢 4-羧基苯頻哪酯載脂蛋白A

沼澤類芽孢桿 甲基烯2-乙磺酯鈉鹽(SSEM)脂蛋白脂

不動(dòng)桿 3-溴-5-氟苯脂多糖

黃曲霉 5-溴-2-氟苯脂聯(lián)

大腸埃希氏 Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-oc腫瘤壞死因子α

釀酒酵母 3,6-二溴噠腫瘤壞死因子β

香菇 6,7-二甲氧乙氧基喹唑啉-4-酮主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類

大腸埃希氏 雙(二乙基氨基)偶膦轉(zhuǎn)化生長因子β1

英諾克李斯特氏 水合硫鋁轉(zhuǎn)化生長因子β3

 


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