當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗原理>> 48T/96T破傷風(fēng)抗體ELISA試劑盒免費(fèi)代測
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
破傷風(fēng)抗體ELISA試劑盒免費(fèi)代測 | Tetanus Ab | FS-P65652 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
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二磷腺苷核糖化因子鳥嘌呤核苷交換因子2抗體Anti-CR1/CD35 Ⅰ型補(bǔ)體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)奈韋拉平角蛋白19(CK-19)ELISA試劑盒
α增強(qiáng)子結(jié)合蛋白1抗體Anti-CD36/PAS-4 CD36抗體奈韋拉平(標(biāo)準(zhǔn)品)角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA試劑盒
脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)10抗體Anti-CD4 CD4抗體磺惡唑角蛋白18-M30(CK 18-M30)ELISA試劑盒
蛋白激酶A錨定蛋白7抗體Anti-CD7 CD7抗體磺惡唑(標(biāo)準(zhǔn)品)角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒
腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體12抗體Anti-CD8 CD8抗體硫頭孢匹羅角蛋白17(CK17)ELISA試劑盒
腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體Anti-CD9/MRP-1 CD9蛋白抗體硫頭孢匹羅(標(biāo)準(zhǔn)品)角蛋白13(CK-13)ELISA試劑盒
三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體Anti-CD40L CD40L抗體阿米舒必利間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒
肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體Anti-Integrin alpha 2b/CD41 血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體阿米舒必利(標(biāo)準(zhǔn)品)間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒
高爾復(fù)合體相關(guān)蛋白1抗體Anti-CD43/SPN CD43抗體非諾貝特間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒
乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體Anti-CD44/PGP1 CD44抗體非諾貝特(標(biāo)準(zhǔn)品)間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒
腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1、2、3、4抗體Anti-CD44v4 CD44V4抗體鹽莫西沙星性T淋巴相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒
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PQBP1 ELISA Kit棲稻假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas oryzihabitans
PRICKLE1 ELISA Kit白僵菌用途: 害蟲生物防治
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PRAM1 ELISA Kit厚垣普奇尼亞菌*注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
CSNK2A1(Casein kinase II subunit alpha) ELISA Kit卷枝毛霉原變型拉丁屬名: Mucor circinelloides f. circinelloides
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