當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T人類皰疹病毒7型核酸檢測試劑盒
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
人類皰疹病毒7型核酸檢測試劑盒 | 熒光PCR法 | FS-P10171 |
PCR技術(shù)的定量原理:?
擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
-93℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
草螺菌屬培養(yǎng)基: CM0033模式菌株: no西沙諾尼成熟果種子內(nèi)提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長條件: 28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法
光黑腹菌屬外生菌根菌模式菌株: no組織塊提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-30
枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基: 0033模式菌株: no土壤樣品提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長條件: 20-30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
葡萄座腔菌 定期移植法生長條件: 25-28提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 14
鹽單胞菌1.海洋石油污染生物修復(fù); 2.生物活性物質(zhì)篩選模式菌株: no水樣/深層海水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃
特羅伊察棲砂桿菌培養(yǎng)基: 745抗重金屬砷,可用于抗砷機(jī)制的研究;可用于生物修復(fù)。沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 18-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-94℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
鮑希瓦氏菌培養(yǎng)基: 745潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群水樣/表層海水提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 26℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
辣椒培養(yǎng)基: 14模式菌株: no豆科提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長條件: 25 定期移植法
白色類諾卡氏菌培養(yǎng)基: CM0011活性物質(zhì)提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長條件: 28C 真空冷凍干燥
假格里朗蒼白桿菌近海細(xì)菌模式菌株: no土壤/椰子樹腐爛芯覆土提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃
中甸隔指孢培養(yǎng)基: 18模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級(jí): 1生長條件: 25℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基: CM0050苧麻脫膠用。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長條件: 30℃ 定期移植法;其他
-95℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
香菇生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基2250g供藥品和生物制品中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)、分離和培養(yǎng)用。
Nutrient Agar Tablets 營養(yǎng)瓊脂 Oxoid 100片 incubation media Nutrient Agar Tablets 營養(yǎng)瓊脂 Oxoid 100片
棉花立枯菌 葡萄酒酵母 支/瓶
大腸桿菌O培養(yǎng)基
抗生素檢定培養(yǎng)基3號(hào)(usp) 250g 藥品抗生素效價(jià)測定
山梨醇麥康克瓊脂基礎(chǔ) SMAC 250克 大腸桿菌O157:H7的選擇性分離培養(yǎng)
MUG培養(yǎng)基 MUG-Medium(with Kovacs) 培養(yǎng)基20g+靛基質(zhì)20m 大腸埃希氏菌快速熒光測定
三糖鐵培養(yǎng)基 Triple Sugar Iron Agar 250克 腸桿菌科細(xì)菌的生化試驗(yàn)
SS瓊脂 Salmonella Shigella Agar 250克 沙門氏菌屬和志賀氏菌屬的分離培養(yǎng)
人類皰疹病毒7型核酸檢測試劑盒復(fù)方中和增菌培養(yǎng)基規(guī)格:9ml*20/盒用途:主要用于含有復(fù)方消劑樣品的增菌培養(yǎng)
替卡西林/克拉維藥敏紙片規(guī)格:75/10 μg/片,20片/瓶用途:用于抗菌藥體外敏感試驗(yàn)。
0.1%煌綠規(guī)格:1ml/支*20用途:每支加入100ml HB4086-3中
SC瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格:250g用途:用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng),需天極D-環(huán)絲氨和50%卵黃乳液(ISO標(biāo)準(zhǔn))
脫氧膽鹽檸檬鹽瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于沙門氏菌和志賀氏菌的分離培養(yǎng)
支原體肉湯培養(yǎng)基(不含瓊脂和酚紅)規(guī)格:250g用途:用于支原體的增菌培養(yǎng)
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