產(chǎn)品介紹:

中文名稱：RET激酶抑制劑(AST 487)

英文名稱：AST 487

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

貨號：FS-X11057

實(shí)驗(yàn)報告：

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

線粒體DNA拓普西異構(gòu)meiⅠ抗體 MT

CD90抗體 CD90 / Thy1

突觸融合蛋白結(jié)合蛋白5抗體 Tomosyn/STXBP5

UNC80蛋白抗體 UNC80

四分子交聯(lián)體4抗體（四旋蛋白） TSPAN4

轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體 TBX18

干燥綜合征相關(guān)蛋白2抗體 TROVE-2

jia狀腺激su受體相互作用蛋白4抗體 TRIP4

轉(zhuǎn)錄因子E2F二聚體蛋白2抗體 TFDP2

TIP30蛋白抗體 TIP30

β-taxilin蛋白抗體 TXLNB

酪蛋白硫suan轉(zhuǎn)移mei1抗體 TPST1
RET激酶抑制劑(AST 487)薏苡鏈格孢 Sarcandrolide D

球形賴芽孢桿 Rauvotetraphylline E

產(chǎn)單核李氏桿 Raucaffricine

大豆慢生根瘤 Protoplumericin A

黑腐皮殼 霹靂蘿芙辛堿

南海紅球 Ocotillone

豬丹絲 蕊木堿甲酯

姬松茸* 辛夷烯酮

匍枝根霉(黑根霉) 7-Geranyloxy-5-methoxycoumarin

黃曲霉 Larixinol

香菇 Jolkinol A

橙色鹽單胞 2,5,14-三乙酰氧基-3-苯甲?；趸?8,15-二羥基-7-異丁酰氧基-9-煙酰氧基氧基-6(

彩色豆馬勃 Isokadsurenin D

鼠李糖乳桿 Isoerysenegalensein E

榿木鏈霉 Erysenegalensein E