轉(zhuǎn)氫酶1檢測(cè)試劑盒微量法-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-01S63451

QQ截圖20220307153604.png
公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過(guò)產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱(chēng)：轉(zhuǎn)氫酶1檢測(cè)試劑盒微量法

規(guī)格：100管/96樣

檢測(cè)方法：微量法

貨號(hào)：FS-01S63451
商品介紹：

測(cè)定意義

TH位于線(xiàn)粒體的內(nèi)膜上，又稱(chēng)為線(xiàn)粒體復(fù)合體六，催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化，調(diào)節(jié)線(xiàn)粒體NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反應(yīng)稱(chēng)為T(mén)H-2，催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。

測(cè)定原理：

NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸（APAD+）替代NAD+，TH-2催化APAD+還原生成APADH，APADH在375nm有特征光吸收，測(cè)定375nm光吸收的增加速率，來(lái)計(jì)算TH-2活性。

需自備的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

粗酶液提取：

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
絲含量測(cè)試盒50管/48樣價(jià)格貝倫格勒座腔梨專(zhuān)化型Rabbit LRP (Lung Resistance-Related Protein) ELISA Kit

葡萄糖-6-磷試劑盒100管/96樣價(jià)格平菇Rabbit MUC3 (Mucin 3) ELISA Kit

單脫氫抗壞血還原（MDHAR）測(cè)試盒50管/48樣價(jià)格變色栓(云芝)Rabbit NUP62 (Nucleoporin 62kDa) ELISA Kit

保幼3（JH3）含量測(cè)試盒100T價(jià)格糙皮側(cè)耳Rabbit FGFBP2 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit

2′-脫氧胞苷-5′-單磷1032-65-1操作方法枯草芽孢桿Rabbit β-EP (Beta-Endorphin) ELISA Kit

5-硝基尿嘧611-08-5說(shuō)明書(shū)香蕉Rabbit EphA2 (Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit

順丁烯二二丁酯售后服務(wù)阿維鏈霉Rabbit CR1 (Complement Receptor type 1) ELISA Kit

小鼠雜交瘤細(xì)胞；c7b8a3釀酒酵母Rabbit GSTθ1/GSTt1 (Glutathione S Transferase Theta 1) ELISA Kit

小鼠Ⅱ型膠原交聯(lián)羧基端肽（CTXⅡ）elisa試劑盒進(jìn)口試劑一色齒毛Rabbit CENPA (Centromere Protein A) ELISA Kit

小鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移1（DNMT1）elisa試劑盒保存擬無(wú)枝Rabbit CKLFSF5 (Chemokine Like Factor Superfamily 5) ELISA Kit

小鼠低氧誘導(dǎo)因子2α（HIF2α）elisa試劑盒進(jìn)口試劑枯草芽孢桿Rabbit ADCY2 (Adenylate Cyclase 2) ELISA Kit

小鼠多巴胺受體D4（DRD4）elisa試劑盒價(jià)格黃色鐮刀*Rabbit TI-Ag (Thymus Independent Antigen) ELISA Kit

小鼠鈣蛋白1（CAPN1）elisa試劑盒價(jià)格炭疽芽孢桿Rabbit PKIβ (Protein Kinase Inhibitor Beta) ELISA Kit

小鼠干擾誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑（ITαC）elisa試劑盒進(jìn)口試劑鮑氏不動(dòng)桿Rabbit GSTω1 (Glutathione S Transferase Omega 1) ELISA Kit

小鼠高分子量激肽原（HMWK）elisa試劑盒售后服務(wù)無(wú)Rabbit ANG (Angiogenin) ELISA Kit
轉(zhuǎn)氫酶1檢測(cè)試劑盒微量法小鼠Qa抗原2Anti-MT-ND1 Antibody人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1（NRG-1）elisa定量檢測(cè)試劑盒

大鼠孕酮受體Anti-MT-ND5 Antibody人生長(zhǎng)2（GH2）elisa定量檢測(cè)試劑盒

兔凝血原片段F1+2Anti-MTG2 Antibody人氧固結(jié)合蛋白樣蛋白1A（OSBPL1A）elisa定量檢測(cè)試劑盒

蓖麻凝集Anti-MTERF1 Antibody人生長(zhǎng)誘導(dǎo)跨膜蛋白（GHITM）elisa定量檢測(cè)試劑盒

小鼠D-乳脫氫Anti-MTERF1 Antibody人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員12（EAR12）elisa定量檢測(cè)試劑盒

人巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1Anti-MTNR1A Antibody人速激肽受體1（TACR1）elisa定量檢測(cè)試劑盒

大鼠白介21Anti-MTIF3 Antibody人糖蛋白V（GP5）elisa定量檢測(cè)試劑盒

豌豆凝集Anti-MTNR1B Antibody人因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3（SOCS3）elisa定量檢測(cè)試劑盒