當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96T載脂蛋白A2撫生ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
載脂蛋白A2撫生ELISA試劑盒 | apoprotein A2 | FS-P66112 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體Integrin a7(integrin alpha 7) 整合素α7抗原胡蘿卜苷(標(biāo)準(zhǔn)品)20S-蛋白酶體(20S-PSM)ELISA試劑盒
磷化原癌因c-Met相關(guān)酪氨激酶抗體integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29) 粘附分子整合素β1抗原β-胡蘿卜素(標(biāo)準(zhǔn)品)205kDa核孔蛋白(NUP205)ELISA試劑盒
絲裂原活化蛋白激酶13抗體Integrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e) 粘附分子整合素α5抗原胡麻屬苷(標(biāo)準(zhǔn)品)2',5'-寡腺苷合成酶3(OAS3)ELISA試劑盒
多纖毛素蛋白抗體Integrin alpha V/CD51 peptide 整合素αV抗原葫蘆巴堿鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)2',5'-寡腺苷合成酶2(OAS2)ELISA試劑盒
肌管素相關(guān)蛋白8抗體JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1) 蛋白質(zhì)酪氨激酶JAK-1抗原葫蘆素B(標(biāo)準(zhǔn)品)2',5'-寡腺苷合成酶1(OAS1)ELISA試劑盒
巨噬甘露糖受體2抗體JAK2(Tyrosine-protein kinase JAK2; Janus kinase 2; JAK-2) 蛋白質(zhì)酪氨激酶JAK-2抗原槲皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)2,3-二磷甘油(2,3-BPG)ELISA試劑盒
周期G1的相互作用蛋白抗體phospho JAK2(phospho-Tyr1007+Tyr1008) 磷化蛋白酪氨激酶JAK-2抗原槲皮素-7-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)188kDa核孔蛋白(NUP188)ELISA試劑盒
主導(dǎo)控制樣蛋白3抗體JNK1/3 (c-Jun amino-terminal kinase 1/3) c-Jun氨末端激酶1/3多肽抗原花椒酚(標(biāo)準(zhǔn)品)17-羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒
絲裂原活化蛋白激酶MKK3抗體phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 磷化氨末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原槐果堿(標(biāo)準(zhǔn)品)17-β-羥類固脫氫酶3(HSD17β3)ELISA試劑盒
MYSM1抗體Ki-67(Antigen identified by monoclonal antibody Ki 67) Ki-67 Antigen環(huán)氧澤瀉烯(標(biāo)準(zhǔn)品)17-α-羥化酶(S17αH)ELISA試劑盒
單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體Klf4 (Kruppel likefactor 4) 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子抗原黃柏堿(標(biāo)準(zhǔn)品)160kDa核孔蛋白(NUP160)ELISA試劑盒
微管相關(guān)蛋白1A抗體phospho-KLF5/Krueppel-like factor 5 (pSer272) 磷化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗原黃柏酮(標(biāo)準(zhǔn)品)15-羥前列腺素脫氫酶(HPGD)ELISA試劑盒
中期因子/肝素結(jié)合生長因子抗體phospho-Klf5/CKLF/Kruppel like factor 5, Human, mo, rat, horse, bovine, rabbit, pig, dog 磷化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗原黃豆黃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)155kDa核孔蛋白(NUP155)ELISA試劑盒
鹽皮質(zhì)激素受體抗體LDH(Lactate Dehydrogenase) 乳脫氫酶抗原黃豆黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)153kDa核孔蛋白(NUP153)ELISA試劑盒
促黑激素α抗體Leptin receptor(a、b、c、d) 瘦素受體抗原(長、中、短型)黃獨(dú)素B(標(biāo)準(zhǔn)品)133kDa核孔蛋白(NUP133)ELISA試劑盒
載脂蛋白A2撫生ELISA試劑盒Anti-PCK2 Antibody中國臺灣根霉拉丁屬名: Rhizopus formosensis
Anti-PCSK1 Antibody肉糜 鵝源性成分(定性)拉丁屬名: 肉糜 鵝源性成分(定性)
Anti-PCSK4 Antibody淡紫擬青霉用途: 用作生物防治研究
Anti-PCSK9 Antibody皮落青霉拉丁屬名: Penicillium crustosum
Anti-PCSK6 Antibody杏鮑菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-PCSK9 Antibody葉球鞘氨單胞菌拉丁屬名: Sphingomonas phyllosphaerae
Anti-PDCD10 Antibody類肺炎克雷伯氏菌類肺炎亞種拉丁屬名: Klebsiella quasipneumoniae subsp. quasipneumoniae
Anti-PDCD1 Antibody松口蘑注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-PDCD1 Antibody速生桿菌拉丁屬名: Celeribacter neptunius
Anti-PDCD10 Antibody大豆慢生根瘤菌用途: 與大豆共生固氮
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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