實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

PCR技術(shù)的定量原理：
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擴增曲線
在Real-time qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于液中。
PCR檢測試劑盒：
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077清酒酵母。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法

青霉屬培養(yǎng)基: CM0014抗癌活性提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C 真空冷凍干燥

炭疽芽孢桿菌培養(yǎng)基: 832模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法

炭疽芽胞桿菌抗炭疽血清及沉淀素血清模式菌株: no炭疽山羊皮提供形式: 凍干物安全等級: 3培養(yǎng)基: 335生長條件: 37

 AS1.1852培養(yǎng)基: 62乳制品發(fā)酵；食品飲料種屬: Bifidobacteriumbifidum(Tissier)Orla-Jensen安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃

結(jié)核分枝桿菌生長條件: 37℃研究提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no 真空冷凍干燥法

 -727℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

正青霉屬活性物質(zhì)，二氫乳脫氫酶抑制活性模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0018生長條件: 26C

釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077苕干原料發(fā)酵制酒精。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 定期移植法

黑海海單胞菌培養(yǎng)基: 524模式菌株: no海洋沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 真空冷凍干燥法

皺褶假絲酵母培養(yǎng)基: 0013模式菌株: no花提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

地衣芽孢桿菌培養(yǎng)基: 33模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 37℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他

AS2.2啤酒酵母模式菌株: no種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃

 -728℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077發(fā)酵制清酒。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 定期移植法

秀珍菇食用菌模式菌株: no朽木提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 17生長條件: 20℃

4-羥基-2-乙    3,3',5,5'-四叔丁基-4,4'-聯(lián)醌

3,5,6-三-2-醇鈉鹽  酐  2-基-6-并噻唑

6-異  肌酐  1-甲基-4-對基醌

4--2-(基)甲酰  偏三酐  對羥基甲醚

3-PHENYL-2-PROPYN-1-OL  3-基-2--1-醇  1504-58-1

2-Deoxy-D-glucose  2-脫氧-D-葡萄糖  154-17-6

Acid Red 27  莧菜紅  915-67-3

Bromopyrogallol Red  溴鄰三酚紅  16574-43-9

大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人胸腺依賴性抗原(TD-Ag)免疫試劑盒 Human thymus-depende aigen,TD-Ag ELISA Kit

軍團菌抗原(LP Ag)ELISA試劑盒 ，英文名： LP Ag ELISA Kit

Ratlipoproteinlipase,LPLELISA試劑盒大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humangrowthhormonerelasingfactor,GH-RFELISA試劑盒人生長激素釋放因子(GH-RF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanLegionellaaibodyIgA，LPAb-IgAELISAKit人軍團菌抗體IgA(LPAb-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
心病毒(SAFV)核酸檢測試劑盒葒草苷28608-75-5中文別名：葒草素  

英文名：Orientin  

登錄號：28608-75-5

分子式：C21H20O11

分子量：448.01

分子結(jié)構(gòu)：

規(guī)格：20mg/支

純度：≥ 98%

用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源：毛茛科植物金蓮花

藥理藥效：葒草苷對缺氧-復(fù)氧心肌細胞損傷具有一定的保護作用。

貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年