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貨號 | FS-X10377 |
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產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Gilteritinib 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg Gilteritinib是一種有效的FLT3/AXL抑制劑,IC50為0.29nM/<1nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1254053-43-4 別名:ASP2215 純度:99.55% 分子量:552.71 結(jié)構式: Gilteritinib結(jié)構式 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱:FLT3和AXL抑制劑(Gilteritinib)
英文名稱:Gilteritinib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10377
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
解淀粉芽孢桿菌新型核蛋白質(zhì)1抗體Human PDGF-BB(Plaet Derived Growth Factor-BB) 黃體生成釋放激(LHRH)
Sinibacillus核仁蛋白3抗體Human PON1(Serum paraoxonase/arylesterase 1) 黃體生成(LH)
絲膜菌屬核孔蛋白1抗體Human PON1(Serum paraoxonase/arylesterase 1) 氧化(XOD)
黑附球菌NADPH氧化4抗體Human PRL(Prolactin) 環(huán)磷腺(cAMP)
暗孢節(jié)菱孢菌脂肪分化因子24Human NGF/NGFβ(Beta-nerve growth factor) 環(huán)磷酰(CTX)
豚鼠氣單胞菌肌動蛋白結(jié)合蛋白Z盤狀蛋白抗體Human PTX3(Pentraxin 3) 環(huán)磷腺(cAMP)
谷棒桿菌活化T核因子5蛋白抗體Human PRSS8(Prostasin) 環(huán)磷鳥(cGMP)
球形賴芽孢桿菌磷化活化T核因子5蛋白抗體Human NID-1(Nidogen-1/Entactin) 環(huán)加氧2(COX-2)
平滑假絲酵母脂質(zhì)運載蛋白抗體Human MFGE8(Lactadherin) 環(huán)孢A(CsA)
波蘭青霉2型神經(jīng)纖維瘤抗體Human NT-3(Neurotrophin-3) 踝蛋白(talin)
緩慢葡萄球菌膜相關磷脂轉(zhuǎn)運蛋白抗體Human NT-4(Neurotrophin-4) 花生四烯5脂氧合(ALOX5/LOG5)
釀酒酵母納曲抗體IgGHuman MMP13(Matrix Metalloproteinase 13) 花生四烯5脂加氧(ALOX-5)
植物乳桿菌磷化分化相關基因NDRG1抗體Human MIA(Melanoma Inhibitory Activity Protein 1) 花生四烯15脂加氧(ALOX15/LOG15)
赤曲霉磷化分化相關基因NDRG1抗體Human MMP-3(Matrix Metalloproteinase 3) 花生四烯(AA)
黑烏霉泛連接NEDD4-2抗體Human MMP-7(Matrix Metalloproteinase 7) 琥珀酰合成(SCS)
煙色毛霉磷化2型神經(jīng)纖維瘤抗體Human MMP-8(Matrix Metalloproteinase 8) 紅原卟啉(EP)
灰葡萄孢Botrytis│cinerea 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR楊梅
哈維弧菌Vibrio│harveyi 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR蘆薈大黃
苜蓿中華根瘤菌Sinorhizobium│meliloti 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR大黃
FLT3和AXL抑制劑(Gilteritinib)多主葡萄殼 噻吩-3-甲乙酯血小板反應蛋白2
耐鹽枝孢 2-甲硫基-4-羥基嘧啶血小板活化因子
肉桂色鏈霉 2,4,5-三嘧啶血小板膜糖蛋白Ⅱb;Ⅲa
土壤彎孢 (±)-降煙堿血小板內(nèi)皮粘附分子1
維多利亞隱球酵母 碳鈷 水合物血小板生成
假單胞 1,5-二甲基-1H-吡唑-3-甲乙酯血小板生成受體
阪崎腸桿 1,3-二甲基-1H-吡唑-5-甲乙酯血小板衍化生長因子B
多分枝毛霉 L-乳鈣血小板衍化生長因子BB
角形小孔 抗壞血鈣血小板衍生生長因子受體α
枯草芽孢桿 乙鎘 二水合物血小板衍生生長因子受體β
海仙屬 2,4-二氧代-4-噻吩-2-基丁甲酯血幼
蟹味菇(白) 4--2-氟苯甲循環(huán)復合物
異常威克漢姆酵母 5-溴-2-苯煙堿型乙酰受體
烏魯木齊奇異球 2-溴-5-氟苯甲還原型輔Ⅰ
圖畫大洋芽孢桿 5--2-氟苯甲延胡索
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