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非甾體芳香酶抑制劑(Letrozole)

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更新時間:2022-05-18 16:35:17瀏覽次數(shù):170次

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貨號 FS-X10596
中文名稱:非甾體芳香酶抑制劑(Letrozole)
英文名稱:Letrozole
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg|200mg|500mg
貨號:FS-X10596
產(chǎn)品介紹:
Letrozole(CGS-20267)是非甾體芳香酶抑制劑。
注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!
號:112809-51-5
別名:CGS 20267
純度:99.9

中文名稱:非甾體芳香酶抑制劑(Letrozole)

英文名稱:Letrozole

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg|200mg|500mg

貨號:FS-X10596

產(chǎn)品介紹:

Letrozole(CGS-20267)是非甾體芳香酶抑制劑。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:112809-51-5

別名:CGS 20267

純度:99.91%

分子量:285.3

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

嗜松青霉核轉(zhuǎn)錄因子SOX8抗體Anti-PROK1 Antibody堿性神經(jīng)酰3(ACER3)

腐皮鐮孢STAC1蛋白抗體Anti-PROK1 Antibody堿性神經(jīng)酰2(ACER2)

韓國海桿狀菌亞砷鹽相關(guān)蛋白抗體Anti-PROM1 Antibody堿性神經(jīng)酰1(ACER1)

山原申氏菌雙鏈RNA結(jié)合蛋白Staufen2抗體Anti-PROM1 Antibody堿性鞘磷脂磷二酯(Alk-Smase)

泡囊短波單胞菌溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體Anti-PROM1 Antibody堿性成纖維生長因子(FGF2)

黃色孢鏈霉菌SNX27蛋白抗體Anti-PROM1 Antibody(PB0168)堿核蛋白2(BNC2)

孟氏假單胞菌電壓開啟的鈉離子通道SCN9A抗體Anti-PROX1 Antibody堿核蛋白1(BNC1)

Cecembia sp.5-羥色受體4抗體Anti-PROS1 Antibody剪切修復(fù)交叉互補(bǔ)修復(fù)缺陷偶聯(lián)因子1(ERCC1)

大腸埃希氏菌5-羥色受體3抗體Anti-Prosurfactant Protein C/SFTPC Antibody剪切多聚腺化特異性因子1(CPSF1)

球孢白僵菌抑癌基因SNF2β抗體Anti-PRX Antibody剪接因子4(SF4)

環(huán)圈鏈霉菌血清應(yīng)答因子抗體Anti-PRX Antibody剪接因子1(SF1)

球孢白僵菌膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體Anti-PRX Antibody減數(shù)分裂重組蛋白5(MEI5)

斑形葉點(diǎn)霉泛樣修飾體-1抗體Anti-PSAT1 Antibody(PB1142)減數(shù)分裂抑制因子1(MEI1)

釀酒酵母信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體Anti-PSCA Antibody監(jiān)理蛋白(SVIL)

蠟狀芽孢桿菌卵巢癌相關(guān)蛋白抗體Anti-PSCA Antibody間隙連接蛋白β1(GJβ1)

球孢白僵菌相關(guān)抗原5抗體Anti-PSD Antibody間隙連接蛋白43(CX43)

核受體蛋白NR2E3抗體潰瘍棒狀桿菌小鼠心肌成纖維細(xì)胞提取物

γ-分泌組件蛋白NCLN抗體接棒桿菌小鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物胞

神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子DPF1抗體溶血隱秘桿菌小鼠食管平滑肌細(xì)胞提取物

N-乙酰轉(zhuǎn)移8抗體鉛黃腸球菌小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞提取物
非甾體芳香酶抑制劑(Letrozole)異常漢遜酵母 代三吡咯烷基鏻六氟磷鹽蛋合成

枯草芽孢桿 8-溴-2'-脫氧鳥3-羥酰脫氫

球形芽胞桿 5-氨基-2-并噻唑ATP

多主葡萄殼 丁基三苯基化膦膜結(jié)合型前列腺E合成1

土曲霉 2-氨基-4-吡啶羧前列腺E合成1

伊氏利斯特氏 N,N-二基磺酰精氨基琥珀合成

白色球形孢囊 Boc-O-芐基-L-蘇氨精氨琥珀裂解

克魯弗酵母 堿式乙鉛半胱氨酰氨肽

東方伊薩酵母  堿式乙鉛鈣調(diào)磷

碳樣小單孢 Boc-Glutaminol天蠶B

季也蒙邁耶氏酵母 堿式乙鉛谷氨酰

矩圓黑盤孢 Fmoc-Glu(OAll)-OH晶體蛋白α

沙氏倚囊霉 2-(三氟甲基)苯硫晶體蛋白β

可可豆醋桿 3-糖原

短小芽孢桿 鋅透明質(zhì)

 


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