HDAC1和HDAC2抑制劑(Romidepsin)-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X10435

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：HDAC1和HDAC2抑制劑(Romidepsin)

英文名稱：Romidepsin

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg

貨號：FS-X10435

產(chǎn)品介紹:

英文名稱：Romidepsin

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg

Romidepsin是一種有效的HDAC1和HDAC2抑制劑，IC50值分別為36nM和47nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號：128517-07-7

別名：FK 228;FR 901228;NSC 630176

純度：99.87%

分子量：540.7

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

瓜亡革菌泛激1抗體Anti-CCNT1 AntibodyCD68分子(CD68)

枯草芽孢桿菌泛激2抗體Anti-CCNE1 AntibodyCD63分子(CD63)

韓國海桿狀菌泛激3抗體Anti-CCR1 AntibodyCD5分子樣蛋白(CD5L)

微紫青霉p53調(diào)控PA26核蛋白抗體Anti-CCR1 AntibodyCD5分子(CD5)

香栓孔菌26S蛋白調(diào)節(jié)亞型S5a抗體Anti-CCR10 AntibodyCD4分子(CD4)

枯草芽胞桿菌枯草亞種絲/蘇蛋白磷3B抗體Anti-CCR2 AntibodyCD45分子(CD45)

靈芝蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移1α抗體Anti-CCR10 AntibodyCD44分子(CD44)

牛肝菌（可訂購）泛連接抗體Anti-CCR2 AntibodyCD44變體6(CD44-v6)

銹色房屋芽胞桿菌PGBD3蛋白抗體Anti-CCR1 AntibodyCD40配體(CD40L)

赭曲霉泛激4抗體Anti-CCR3 AntibodyCD3分子(CD3)

壞死梭桿菌壞死亞種膜鈣ATP1抗體Anti-CCR2 AntibodyCD34分子(CD34)

Taonella膜鈣ATP4抗體Anti-CCR3 AntibodyCD30分子(CD30)

嗜放線線束菌*膜鈣ATP4B抗體Anti-CCR3 AntibodyCD22分子(CD22)

大腸埃希氏桿菌膜鈣轉(zhuǎn)運ATP抗體Anti-CCR3 AntibodyCD209分子(CD209)

Paenibacillus溶質(zhì)載體蛋白家族21成員2抗體Anti-CCR4 AntibodyCD19分子(CD19)

白色念珠菌脈周蛋白1抗體（胃癌抗原蛋白Ga50）Anti-CCR4 AntibodyCD15分子(CD15)

Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格：98%,BR,一物

鴨瘟立默氏菌Riemerella│anatipestifer 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

: AS3.3416資源名稱: 外來毛霉質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
HDAC1和HDAC2抑制劑(Romidepsin)枯斑擬盤多毛孢 6-三氟-3-彈力蛋白

木耳屬吖啶酮乙硫腦脂

北京諾卡氏 5-噻唑甲草酰乙

根瘤 Chloro[tris(para-trifluoromethylphenyl)phosphine]g氨基己糖

兩歧雙歧桿 3-(全氟正辛基)-1,2-環(huán)氧烷谷氨酰合成

殺鮭氣單胞 1,4-二苯-d4外信號調(diào)節(jié)激

麥根腐平臍蠕孢順-5-降烯-endo-2,3-二羧腺單磷活化蛋白激α1

紫黑杜搟氏 2--6-甲氧基苯上皮中性?；罨?8

產(chǎn)二鏈霉 2,6-二吡啶-3-羧核糖體40S小亞基S6K蛋白激

釀酒酵母 2,3-己二酮真核起始因子結(jié)合蛋白1

橙灰緊旋鏈霉 2-－１,3-二氟-4-雷帕霉靶蛋白1

鴨疫里氏桿 2--2,2-二氟苯乙酮二氧化硫

紫色紅曲 1,5-環(huán)辛二烯雙(甲基聯(lián)苯基磷化氫)銥(I)六氟磷鹽三磷肌

糞產(chǎn)堿氟銅可溶性白分化抗原14亞型

白地霉十一烯酰Salusin肽α
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)