SCD1抑制劑(A939572)-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X10598

產(chǎn)品介紹:

A939572是一種有效的SCD1抑制劑，作用于mSCD1和hSCD1，IC50分別為<4nM和37nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號：1032229-33-6

別名：stearoyl-CoA desaturase (SCD) inhibitor;SCD-inhibitor

純度：99.79%

分子量：387.86

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

中文名稱：SCD1抑制劑(A939572)

英文名稱：A939572

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

貨號：FS-X10598

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

蒙氏假單胞菌磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體Anti-PTGER2 Antibody甲狀腺受體α(THRα)

乳鏈球菌4羥基壬烯抗體Anti-PTGER4 Antibody甲狀腺激自身抗體(THAA)

德氏乳桿菌神經(jīng)突出相關(guān)蛋白Slitrk1抗體Anti-PTGES3 Antibody甲狀腺激反應(yīng)基因(THRSP)

峽灣嗜冷桿菌菌體蛋白抗體Anti-PTGS1 Antibody甲狀旁腺受體2(PTHR2)

茄鐮孢骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST抗體Anti-PTGS1 Antibody甲狀旁腺受體1(PTHR1)

酒紅鏈霉菌24脫氫膽固還原抗體Anti-PTGS2 Antibody甲狀旁腺激2(PTH2)

云芝栓孔菌（變色栓菌）膽鹽磺基轉(zhuǎn)移Anti-PTGS1 Antibody(PB0036)甲型肝炎病受體2(HAVCR2)

靈芝屬轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體Anti-PTH1R Antibody甲酰肽受體2(FPR2)

銅綠假單胞菌磷化轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體Anti-PTGS2 Antibody甲巰蛋白(TPN)

泰國葡糖桿菌磷化蛋白酪磷2抗體Anti-PTGS2 Antibody甲羥戊脫羧(MVD)

中慢生華癸根瘤菌長鏈脂肪連接抗體Anti-PTGS2 Antibody甲羥戊激(MVK)

油白蘑超氧化物歧化3抗體Anti-PTK2 Antibody甲硫腺磷化(MTAP)

黃色單胞菌硫酯2蛋白抗體Anti-PTN Antibody甲硫酰肽2(METAP2)

寡氧單胞菌Rho GTP激活蛋白13抗體Anti-PTK2 Antibody甲硫酰肽1(METAP1)

蘇云金芽孢桿菌鉻瘤患者抑癌基因SDHB抗體Anti-PTN Antibody巴1β(MEP1β)

針葉散斑殼菌類固5α還原2抗體Anti-PTP4A2 Antibody巴1α(MEP1α)

腺二核1抗體庫氏棒桿菌小鼠胰島細胞提取物

鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體Staphylococcuscarnosussubsp.carnosus小鼠甲狀腺上皮細胞提取物

核孔復(fù)合體蛋白抗體小片球菌小鼠胰腺上皮細胞提取物

霉敏感性肽蛋白抗體麻疹孿生球菌小鼠乳腺上皮細胞提取物
SCD1抑制劑(A939572)*美味牛肝 5-硝基間苯二甲二甲酯硫轉(zhuǎn)移

白色噬瓊膠 (3S)-(-)-3-(二甲氨基)吡咯烷類胰蛋白

大豆慢生根瘤鹽樂卡地平旋毛蟲IgG抗體

乳粉孢化鎢查爾酮異構(gòu)

鞘氨盒屬 4--2,5-二氟三磷腺

空腸彎曲桿碲化銻(III)磷脂

牛艾美耳球蟲三吡咯烷基溴化鏻六氟磷鹽磷脂肌3激

大腸埃希 D-葡萄烯糖苯解氨

發(fā)皮安假絲酵母 4-(2-氨乙基)吡啶磷化腺活化蛋白激

香菇 Nα-Boc-Nδ-三苯甲基-L-谷氨酰甘油激

*美味牛肝 Nα-Fmoc-Nγ-三苯甲游基-L-谷五氟苯酯山梨脫氫

粉紅單端孢 L-天門冬二維生C

三葉草根瘤 Fmoc-N-三苯甲基-L-谷氨酰1,4,5-三磷肌

白側(cè)耳 5-基硅烷基-4-戊炔-1-色P450單加氧

漢遜德巴利酵母fabryi變種 Cilnidipine睪酮

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