當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T免疫球蛋白GELISA試劑盒
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
免疫球蛋白GELISA試劑盒 | Immunoglobulin G | FS-P65582 |
公司產(chǎn)品僅用于科研ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
脯氨脫氫酶抗體磺嘧啶銀
蛋白酶調(diào)解因子8抗體磺噻唑
蛋白C抑制因子抗體磺達肝癸鈉
原鈣粘蛋白γB5抗體茴三;膽維他
蛋白酶體PSMα5抗體甲磺司特
含patatin樣磷脂酶6抗體甲磺多拉司瓊
神經(jīng)叢蛋白A4抗體甲磺加貝酯
多形性腺瘤因樣蛋白2抗體甲磺加替沙星
表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體甲磺雷沙吉蘭
磷化心臟磷蛋白抗體甲磺羅哌卡因
磷化心臟磷蛋白抗體甲磺瑞波西汀
蛋白酪氨磷酶樣N前體蛋白抗體甲帕羅西汀
26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型p55抗體甲二苯馬尼/二苯馬尼甲鹽
過氧化物酶肌氨氧化酶抗體甲巰咪唑/他巴唑/2-巰-1-甲咪唑
prox-1抗體甲氧普
免疫球蛋白GELISA試劑盒Human SH2D5 ELISA Kit巨型艾美耳球蟲拉丁屬名: maxima
Human SH3BGRL2(SH3 Domain Binding Glutamate Rich Protein Like 2 ) ELISA Kit葡萄座腔菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human SH3BGRL3(SH3 domain-binding glutamic acid-rich-like protein 3) ELISA Kit金龜子綠僵菌小孢變種用途: 生物防治
Human SH3BP1 ELISA Kit栗疫菌拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
Human SH2D2A ELISA Kit魯杰氏菌拉丁屬名: Ruegeria sp.
Human SH2D3A ELISA Kit大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
Human SH2D3C ELISA Kit枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Human AKR1B10(Aldo-keto reductase family 1 member B10) ELISA Kit炭疽芽胞桿菌拉丁屬名: anthracis
Human SGLT3/SLC5A4 ELISA Kit棲藻海桿狀菌拉丁屬名: Marinobacter algicola
Human SFXN1 ELISA Kit芥黃蜜環(huán)菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
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