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ALK抑制劑(CH5424802)

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更新時間:2022-05-18 13:23:40瀏覽次數:185次

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貨號 FS-X10386
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中文名稱:ALK抑制劑(CH5424802)

英文名稱:CH5424802

產品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

貨號:FS-X10386

產品介紹:

英文名稱:CH5424802

產品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

CH5424802是一種有效的選擇性的ALK抑制劑,IC50為1.9nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:1256580-46-7

別名:Alectinib;AF802

純度:99.34%

分子量:482.62

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

雪腐微座孢胞內活化的Notch1蛋白抗體Human CD25(Interleukin 2 Receptor Alpha) 高分子量角蛋白(CK-HMW)

發(fā)酵乳桿菌神經鈣傳感蛋白1抗體Human CD32(Receptor II for the Fc Fragment of IgG) 高爾基體抗體(AGAA)

毛地黃殼針孢神經元鈣結合相關蛋白EFCBP1抗體Human GP4(Plaet Membrane Glycoprotein IV) 高爾基蛋白73(GP-73)

彎孢菌膜相關蛋白樣蛋白NUMBL抗體Human CCDC3(Coiled-coil domain-containing protein 3) 高半胱(Hcy)

匍匐曲霉原變種霉敏感性肽蛋白抗體Human CD40L(Cluster of Differentiation 40 Ligand) 剛地弓形蟲(T.gondii)

金橙黃微小桿菌N-乙基順二酰亞敏感融合蛋白抗體Human CD80(T-lymphocyte activation antigen CD80) 干因子受體(SCFR)

芽孢桿菌NIPAL2蛋白抗體Human CD56(Neural Cell Adhesion Molecule) 干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)

短波單胞菌屬神經營養(yǎng)因子HNT抗體Human CD13(Aminopeptidase N) 干生長因子(SCF)

青春雙歧桿菌軸突蛋白1β/Neurexin 1β抗體Human DLL1(Delta-like protein 1) 干擾誘導跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)

匍枝根霉原變種谷受體3A抗體Human E-Cad(E-Cadherin) 干擾誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)

枯草芽孢桿菌谷受體3B抗體Human CRP(C-Reactive Protein) 干擾誘導T趨化因子(ITAC/CXCL11)

藤黃淺藤黃鏈霉菌谷受體3A+3B抗體Human CXCL10(Interferon Gamma Induced Protein 10kDa) 干擾調節(jié)因子8(IRF8)

雜色曲霉P53誘導凋亡抑制蛋白α抗體Human RAC1(Ras Related C3 Botulinum Toxin SubstRate 1) 干擾調節(jié)因子3(IRF3)

蘋果黑腐皮殼菌胞質5'核1A抗體Human EG-VEGF(Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor) 干擾調節(jié)因子(IRF)

白地霉NOC2家族樣蛋白抗體Human PI3(Peptidase Inhibitor 3, Skin Derived) 干擾活化基因205(Ifi205)

溜曲霉硝基酪抗體Human GP4(Plaet Membrane Glycoprotein IV) 干擾a-抗體(Anti-IFN-ab)

盧森坦海旋菌Thalassospira│lucentensis 質量規(guī)格:>98%,BR

魯氏不動桿菌Acinetobacter│lwoffii 質量規(guī)格:>99%,BR

ATCC22687=JCM1455=IFO10318=CCRC22069資源名稱: 膜醭畢赤酵母 質量規(guī)格:BR,羅氏進分
ALK抑制劑(CH5424802)阿克蘇海洋桿 煙酰肼總膽紅

葡萄座腔 原卟啉總膽汁

擬青霉 2,6-二-3-(三氟甲基)吡啶總蛋白

黃孢紫紅菇 3-溴-2-總甲狀腺

棕黑腐質霉 4--3-氟甲苯總抗氧化能力

毛腿環(huán)銹傘 三氟甲磺鈣總腺原

球孢白僵 阿曲汀足標記蛋白;足盂蛋白

蕈狀芽孢桿 (-)-鹽東莨菪堿阻抑

黑曲霉 4--7-氮雜組脫羧

維及尼鏈霉 甲狀腺鈉 水合物組

曲霉 1,3-二咔唑-9-基苯組-N-甲基轉移

四川散斑殼 (S)-1-Cbz-3-氨基吡咯烷鹽鹽組織蛋白K

尖孢鐮刀 戊四唑組織多肽抗原

間型彎孢 4-甲基辛組織激肽釋放

 


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