當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>大鼠ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TNGF大鼠神經(jīng)生長因子ELISA試劑盒實驗原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | NGF大鼠神經(jīng)生長因子ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Rat Nerve growth factor, NGF Elisa Kit |
貨號 | FS-R64691 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
熱休克蛋白90β/HSP90 β 抗體英文全稱Insulin-like growth factor antibody英文簡稱IGF Ab檢測范圍5236nmol/L-480pg/mL
HIG1區(qū)域家族成員2A抗體英文全稱apoprotein C4英文簡稱APOC4檢測范圍5237nmol/L-32mg/dL
環(huán)化核苷酸調(diào)控陽離子通道蛋白亞型4英文全稱Fibrinogen β英文簡稱FGβ檢測范圍5238nmol/L-4000μg/mL
磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白抗體英文全稱BELSA英文簡稱BELSA檢測范圍5239nmol/L-800ng/mL
HER2受體抗體英文全稱ELRIR英文簡稱ELRIR檢測范圍5240nmol/L-640ng/mL
結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗體英文全稱Interleukin 6 Antibody英文簡稱IL-6 Ab檢測范圍5241nmol/L-160pg/mL
高遷移率族蛋白B4抗體英文全稱Factor Ⅷ-related Antigen英文簡稱FⅧAg檢測范圍5242nmol/L-12ng/mL
組蛋白去乙酰化酶2抗體英文全稱phospho-extracellular signal-regulated kinase 2英文簡稱pERK2檢測范圍5243nmol/L-2400pg/mL
乙肝病Large S蛋白抗體英文全稱Ras英文簡稱Ras檢測范圍5244nmol/L-1800pg/mL
HA tag標(biāo)簽單克隆抗體英文全稱Raf-1 kinase inhibitor protein英文簡稱RKIP檢測范圍5245nmol/L-800pg/mL
血紅素抗體英文全稱Cannabinoids英文簡稱Cannabinoids檢測范圍5246nmol/L-200pg/mL
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體英文全稱proteoglycan A英文簡稱PGA檢測范圍5247nmol/L-800ng/mL
神經(jīng)膠質(zhì)生長因子/神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白β抗體英文全稱proteoglycan B英文簡稱PGB檢測范圍5248nmol/L-1000ng/mL
特異性鉀離子通道蛋白抗體英文全稱Dopamine D4 receptor英文簡稱D4R檢測范圍5249nmol/L-2000pg/mL
組氨酸三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體英文全稱Dopamine D5 receptor英文簡稱D5R檢測范圍5250nmol/L-1600pg/mL
組蛋白去乙?;?/font>3抗體英文全稱Dopamine D3 receptor英文簡稱D3R檢測范圍5251nmol/L-2000pg/mL
人巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒Histone H4 Antibody100 ul
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒Evi-1 (C50E12) Rabbit mAb500 ul
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒SimpleChIP® Human ZNF335 Promoter Primers100 ul
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒 Acetyl-Histone H4 (Lys8) Antibody20 ul
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒Acetyl-Histone H4 (Lys8) Antibody100 ul
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒Histone H2A.X Antibody100 ul
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒Galectin-9 (D9R4A) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul
人巨噬細(xì)胞集落激因子(M-CSF)ELISA試劑盒Naked2 (C36D3) Rabbit mAb100 ul
NGF大鼠神經(jīng)生長因子ELISA試劑盒實驗原理雞胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus niger
人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA Kit,48T/96T 用途: 紅麻制漿
鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Penicillium waksmanii
豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Acinetobacter indicus
大鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Bacillus
兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Alkalibacillus haloalkaliphilus
人胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: tenella
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