當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T艱難梭菌(CD)核酸檢測試劑盒
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
艱難梭菌(CD)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10471 |
PCR技術(shù)的定量原理:?
擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
分隔北里孢菌培養(yǎng)基: 0011模式菌株提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
喜根考克氏菌培養(yǎng)基: 1003生物活性微生物/潛在的抗腫瘤活性沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
門多薩假單胞菌培養(yǎng)基: 0002檢測、土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 30-37℃ 真空冷凍干燥法
NRRL18395培養(yǎng)基: 609模式菌株: no種屬: Saccharopolyspora│spinosa提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法
-681℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
東方伊薩酵母培養(yǎng)基: CM0077飼料酵母。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 32-34℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
柴油食烷菌有機污染物降解菌/石油烴類降解菌模式菌株: no水樣/近海海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 28℃
泛菌培養(yǎng)基: 141模式菌株: no山茶葉片提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 28 定期移植法
大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: 33用于表達(dá)DBT脫硫酶系及進(jìn)行脫硫活性分析提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
金黃色葡萄球菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0051提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法
新鞘氨醇菌培養(yǎng)基: 471未檢測到果膠酶、酪蛋白酶、纖維素酶、淀粉酶、瓊脂酶,檢測到過氧化氫酶沉積物/箱式沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 30℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-682℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
蛹蟲草生長條件: 24℃培養(yǎng)基: 14提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 礦物油法;定期移植法
暫無培養(yǎng)基: CM0181模式菌株: no昆蟲糞便提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
白井盤多毛孢培養(yǎng)基: 14模式菌株: no葉子提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法
鐮孢培養(yǎng)基: 0014模式菌株: no華山松皰銹病感病植株樹皮提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
2,4-二羥基-3-甲基 2--4-甲氧基 1-羥基苊
5-溴-4-甲基-1H-吲唑 4-乙炔基甲醚 (S)-(+)-1-基茚
3-乙?;?7(1H)-氮雜吲哚 咪唑并[1,2-b]噠嗪 5-基茚旦
2-溴-1,3-二-5- 4-乙基乙炔 1-基芘
Isoprothiolane 稻瘟靈 50512-35-1
Tetra-n-butyltin 四丁基錫 1461-25-2
OCTYLTRICHLOROTIN 乙辛基三化錫 3091-25-6
acetic acid, mercaptophenyl-, ethyl ester, s-ester with o,o-dimethyl phosphorod 13376-78-8
大鼠硬脂酰輔酶A去飽和酶1(SCD1)ELISA試劑盒 ,英文名: SCD1 ELISA Kit
人免疫球蛋白輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)ELISA檢測試劑盒Humankappaimmunoglobulinlightchain,κ-IgLCELISAKit 96T/48T
大鼠白介素12(IL-12/P40)免疫試劑盒 Rat Ierleukin 12,IL-12/P40 ELISA KIT
CLIAKitfoARC/CCL17(Humahymusactivatioegulatedchemokine)ELISAKit人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子規(guī)格:48T/96T
人體MethylteahydrofolatereductaseRFLP基因分析試劑盒20次
ELISAKitARPA/Rib-P人抗核糖體P蛋白抗體規(guī)格:48T/96T
艱難梭菌(CD)核酸檢測試劑盒脫水穿心蓮內(nèi)酯134418-28-3中文別名:穿心蓮丁素
英文名:Dehydroandrographolide
登錄號:134418-28-3
分子式:C20H28O4
分子量:332.42
分子結(jié)構(gòu):
外觀:無色針狀結(jié)晶(30%或50%乙醇)
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:爵床科植物穿心蓮 Andrographis paniculata(Burm.f.)Nees 的葉
溶解性:易溶于乙醇、,可溶于,微溶于,幾乎不溶于水。
熔點:204℃
藥理藥效:脫水穿心蓮內(nèi)酯具有抗炎解熱作用。能抑制炎癥時毛細(xì)血管通透性的增高和炎性水腫的發(fā)展, 并能減少炎性滲出量, 但對增生性炎癥則無明顯影響。臨床用于呼吸道及腸道感染性疾病有較好療效。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
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