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FTase抑制劑(Tipifarnib)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 16:42:33瀏覽次數(shù):184次

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貨號 FS-X10606
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中文名稱:FTase抑制劑(Tipifarnib)

英文名稱:farnesyltransferase inhibitor

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10606

產(chǎn)品介紹:

Tipifarnib是一種有效的,特異性的farnesyltransferase(FTase)抑制劑,IC50值為0.6nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:192185-72-1

別名:IND 58359;R115777

純度:98.63%

分子量:489.4

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

糞鞘桿菌兔抗豚鼠IgMAnti-RIPK2 Antibody肌球蛋白重鏈2(MYH2)

根瘤菌兔抗馬IgGAnti-RMI2 Antibody肌球蛋白重鏈11(MYH11)

短芽孢桿菌屬兔抗人IgMAnti-RNASE4 Antibody肌球蛋白重鏈10(MYH10)

釀酒酵母兔抗猴IgMAnti-RNASE3 Antibody肌球蛋白重鏈1(MYH1)

短芽孢桿菌兔抗小鼠IgMAnti-RNASE1 Antibody肌球蛋白輕鏈激(MYLK)

菌生假絲酵母兔抗小鼠k鏈Anti-RND1 Antibody肌球蛋白輕鏈9(MYL9)

釀酒酵母兔抗長爪沙鼠IgGAnti-RNF169 Antibody肌球蛋白輕鏈2(MYL2)

炭黑曲霉兔抗水貂IgGAnti-RNF168 Antibody肌球蛋白輕鏈1(MYL1)

福氏志賀氏菌驢抗人IgGAnti-RNF31 Antibody肌球蛋白ⅩⅨ(MYO19)

釀酒酵母驢抗兔IgGAnti-RNF186 Antibody肌球蛋白ⅩⅧB(MYO18B)

斑玉蕈驢抗豚鼠IgGAnti-RNF123 Antibody肌球蛋白ⅩⅧA(MYO18A)

維多利亞維希尼克氏酵母鼠抗人IgG單克抗體Anti-RNF43 Antibody肌球蛋白ⅩⅥ(MYO16)

ArthrobacterPE-Cy5.5標記的兔抗犬IgM抗體Anti-RNF8 Antibody肌球蛋白ⅩⅤ(MYO15)

產(chǎn)氮假單胞菌PE-Cy7標記的兔抗犬IgM抗體Anti-ROBO1 Antibody肌球蛋白Ⅹ(MYO10)

產(chǎn)脲節(jié)桿菌Alexa Fluor 350標記的兔抗犬IgM抗體Anti-RNH1 Antibody肌球蛋白ⅨB(MYO9B)

鐮刀菌屬Alexa Fluor 488標記的兔抗犬IgM抗體Anti-ROCK2 Antibody(PB0428)肌球蛋白ⅨA(MYO9A)

核孔蛋白NUP160抗體藤倉赤霉小鼠嗅鞘細胞提取物

細胞核分離基因C蛋白抗體舊金山乳桿菌小鼠神經(jīng)元細胞提取物

痛覺調(diào)節(jié)肽NPFF抗體副干酪乳桿菌副干酪亞種小鼠小腦顆粒細胞提取物

神經(jīng)4抗體擬態(tài)弧菌小鼠腦膜細胞提取物
FTase抑制劑(Tipifarnib)鏈球(不定種) 二二茂鋯白介6

多粘類芽孢桿 N-芴甲氧羰基-D-天冬-4-叔丁酯白介1β

橄欖色盾殼霉 雙(環(huán)戊二烯)釕白介10

飛禽島海草球 1,1'-聯(lián)萘-2,2'-雙(三氟磺酯)雌

大腸埃希氏 羥基-γ-環(huán)糊精前列腺特異性抗原

石竹伯克霍爾德氏 (S)-2-Boc-氨基-1,4-丁雌二

Cecembia 1,1':3',1''-三聯(lián)苯-5'-孕酮

Paenochrobactrum glaciei 對曱?;筋l那酯繆勒管抑制物質(zhì);抗繆勒管

禾稈鐮孢霉 6-(4-甲氧基苯基)-2-甲基-3,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-3-酮鹽鹽白介8

放射型根瘤 (R,R)-2,6-雙(4-苯基-2-惡唑啉-2-基)吡啶活性氧簇

釀酒酵母 Fmoc-O-叔丁基-D-絲天門冬氨基轉(zhuǎn)移;谷草轉(zhuǎn)氨

豬鏈球分型血清參考品 血清型 SS16 4-溴-2-氟吡啶谷轉(zhuǎn)氨

無花果假單胞 2-溴-3-吡啶甲短鏈脂肪

細鏈格孢 三氟磺銦堿性成纖維生長因子

類芽孢桿 1-氨基環(huán)基鹽鹽血小板源性生長因子

 


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