當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T凋亡誘導因子撫生ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | 凋亡誘導因子撫生ELISA試劑盒 |
英文名稱 | apoptosis inducing factor |
貨號 | FS-P65171 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體產(chǎn)品別名: 辛酯扎西他濱,2',3'-二脫氧胞苷
肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶2抗體產(chǎn)品別名: 2-氟-3-甲氧吡啶子囊霉素
肉堿氧位甲轉(zhuǎn)移酶抗體產(chǎn)品別名: 2-氨-5-溴苯甲酰紫杉
IV型膠原α3結(jié)合蛋白抗體產(chǎn)品別名: 4-正辛苯左亞葉鈣;甲酰四氫葉鈣
肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1B抗體產(chǎn)品別名: 芬戈莫德阿卡地新(AICAR)
膽固27α羥化酶抗體產(chǎn)品別名: 1,3-二氫噻吩[3,2-D]嘧啶-2,4阿利克侖半富馬鹽
膽固24α7羥化酶抗體產(chǎn)品別名: 1-氟-4-羥-1,4-重氮化二環(huán)2.2.2辛烷雙(四氟鹽)阿齊沙坦
色素P450 4A1抗體產(chǎn)品別名: 4,4'-(2,3-乙烯雙氧噻吩-5,7-二)雙(N,N-雙(4-甲氧苯)苯)阿昔莫司,阿西莫司
色素P4504A22抗體(脂肪Ω羥化酶)產(chǎn)品別名: 1-Boc-3-氨甲哌啶阿折地平
周期蛋白依賴性激酶抑制劑2D抗體產(chǎn)品別名: 胱安倍生坦
膽固24S-羥化酶產(chǎn)品別名: 吡唑并[1,5-A]吡啶-3-甲乙酯氨力農(nóng)
豬瘟病抗體產(chǎn)品別名: Bromosporine氨地平
色素c氧化酶亞型2抗體產(chǎn)品別名: 3-溴-2-氟苯乙酮奧美沙坦;奧美沙坦
周期素G2抗體產(chǎn)品別名: 1--4--2-甲氧苯奧美沙坦酯
銅藍蛋白抗體產(chǎn)品別名: 奎寧環(huán)-3-倍他洛爾
凋亡誘導因子撫生ELISA試劑盒Human ILK-1(Integrin-Linked Kinase 1) ELISA Kit克魯斯假絲酵母拉丁屬名: Candida krusei
Human ULK1(Unc-51 Like Kinase 1) ELISA Kit小殼焦孢屬用途: 植物病原物;用于該類群菌的系統(tǒng)學研究
Human PDCD1LG2(Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 2) ELISA Kit釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Human PPP2R1A(Serine/threonine-protein phosphatase 2A 65 kDa regulatory subunit A alpha isoform) ELISA Kit釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Human C6(Complement C6) ELISA Kit蠟狀芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus cereus
Human CALCRL(calcitonin receptor-like receptor) ELISA Kit蘇云金芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus thuringiensis Berliner
Human VACM-1(Cullin 5) ELISA Kit白僵菌用途: 害蟲生物防治
Human TSC2(Tuberous Sclerosis Protein 2) ELISA Kit傳染性喉氣管炎病拉丁屬名: Infectious laryngotracheitis virus
Human Rbx2(RNF7) ELISA Kit釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Human CD72(B-cell differentiation antigen) ELISA Kit矩圓黑盤孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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