當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>抑制劑激活劑>> IDH2突變酶抑制劑(Enasidenib)
貨號 | FS-X10451 |
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英文名稱:Enasidenib
產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10451
產品介紹:
英文名稱:Enasidenib 產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Enasidenib是一種有效的可逆的選擇性IDH2突變酶抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1446502-11-9 別名:AG-221 純度:99.91% 分子量:473.38 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
扶桑本森頓酵母酪酪肽抗體Anti-CIC Antibody白介17(IL-17)
串珠鐮孢麻瘋病和帕金森氏病共同調節(jié)蛋白抗體Anti-CINP Antibody白介16(IL-16)
鞘脂菌屬環(huán)指蛋白131抗體Anti-CIITA Antibody白介15(IL-15)
植物乳桿菌磷脂A2激活蛋白抗體Anti-CHUK Antibody(PB0148)白介12(IL-12/P70)
慢生根瘤菌胸磷化抗體Anti-CIP2A Antibody白介12(IL-12/P40)
裂褶菌piwi樣2蛋白抗體Anti-CISD2 Antibody白介11(IL-11)
假蜜環(huán)菌(蜜環(huán)菌、小蜜環(huán)菌、榛蘑)早老蛋白-2抗體Anti-CISH Antibody白介10(IL-10)
羅輪隱球酵母組蛋白賴去甲基化PHF8抗體Anti-CKAP4 Antibody白分化抗原配體40(CD40/TNFRSF5)
嗜果膠黃桿菌腫瘤壞死因子受體相關蛋白2抗體Anti-CKAP5 Antibody白分化抗原CD40配體(CD40L/TNFSF5)
慢生海桿狀菌蛋白調解因子7抗體Anti-CKB Antibody白介6受體(IL-6R)
自養(yǎng)黃色桿菌磷化增殖核抗原抗體Anti-Clathrin heavy chain/CLTC Antibody白介20(IL-20)
短小桿菌屬磷化腺單磷活化蛋白激β1抗體Anti-CKM Antibody白介1受體拮抗劑(IL-1RA)
大腸埃希菌脫氫E1β亞單位抗體Anti-Claudin 1/CLDN1 Antibody白介1β(IL-1B)
豇豆慢生根瘤菌磷化β抗體Anti-Claudin 5/CLDN5 Antibodyγ干擾誘導單核因子(MIG/CXCL9)
人心桿菌胰淀粉抗體Anti-Claudin 3/CLDN3 Antibodyγ干擾誘導單核因子(MIG/CXCL9)
地衣芽孢桿菌脫氫α1抗體Anti-Claudin 3/CLDN3 AntibodyL選擇(SELL)
頂孢霉屬Acremonium│sp. 質量規(guī)格:>99%,一
大杯傘Clitocybe│maxima (Gartn. & G. Mey.) P. Kumm. 質量規(guī)格:>98%,BR
漢遜德巴利酵母Debaryomyces│hansenii 質量規(guī)格:>97%,進分,Sigma T4376
IDH2突變酶抑制劑(Enasidenib) 4-溴苯甲二乙基縮Ⅰ型膠原C端肽
爪哇根霉 2,6-二溴-4-氟血清白蛋白
枯草芽孢桿 苯乙基N-羥乙酰神經
陳華癸氏中間根瘤 雙(二叔丁基苯基膦)二化鈀(II)胰腺癌標志物-CA242
季也蒙有孢漢遜酵母 Boc-Lys(Z)-OSuS-亞硝基
構巢曲霉 N-(叔丁氧羰基)-D-谷1-苯甲酯多巴-β羥化
草木樨中華根瘤 Acebutolol HClⅡ型膠原a1
雅致小克銀漢霉 (S)-叔丁基亞磺酰β-1,3-糖基轉移
分枝卷霉 帕拉金糖水合物β-1,3-糖基轉移
大腸埃希氏桿 4--3-三氟甲巨噬炎性蛋白1β
釀酒酵母 BOC-L-Α-氨基丁色P4503A4
灰樹花 3-氨基-2,6-二蛋白 DJ-1
東方伊薩酵母 新亞銅試劑半水合物磷化信號轉導分子SMAD-3
短柄帚霉 3,5-二溴-4-溶體
薄蓋靈芝 3-溴-4-硫氧化還原蛋白2
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