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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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FGFR4抑制劑(BLU-554)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-23 14:13:21瀏覽次數(shù):167次

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貨號(hào) FS-X10753
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PCNA(Human proliferating cell nuclear antigen antibody) ELIS

中文名稱:FGFR4抑制劑(BLU-554)

英文名稱:BLU-554

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號(hào):FS-X10753

產(chǎn)品介紹:

BLU-554是一種有效的FGFR4抑制劑。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號(hào):1707289-21-1

純度:99.84%

分子量:503.38

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

熒光假單胞菌雙氫睪偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Anti-GPR158 Antibody人血管緊張Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)

產(chǎn)氣腸桿菌己烯雌偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Anti-GPR171 Antibody人血管緊張Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)

球孢白僵菌雙氫睪偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPR171 Antibody人血管緊張Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)

葡萄座腔菌2,4-二氧乙偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Anti-GPR160 Antibody人血管緊張Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)

長(zhǎng)隱球酵母多價(jià)重組人登革熱病診斷抗原Anti-GPR173 Antibody人血管緊張Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)

大腸埃希菌異常凝血原/脫-γ-羧基凝血原抗原Anti-GPR173 Antibody人血管緊張Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)

惡臭假單胞菌腸道病71型/手足口病病抗原Anti-GPR176 Antibody人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)

球孢白僵菌Anti-GPR180 Antibody人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)

多欄純潔桿菌表皮生長(zhǎng)因子多肽Anti-GPR174 Antibody人抗鈣調(diào)特異抗體(CAM-ab)

廣食黃桿菌上皮粘附分子/表皮粘附分子Anti-GPR180 Antibody人抗鈣調(diào)特異抗體(CAM-ab)

人參布哈加瓦氏菌上皮粘附分子/表皮粘附分子抗原Anti-GPR19 Antibody人甲狀腺非肽激抗體(THAA)

成團(tuán)泛菌雌二偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPR25 Antibody人甲狀腺非肽激抗體(THAA)

球毛殼骨骼肌烯化多肽Anti-GPR20 Antibody人抗類固生成抗體(SCA)

釀酒酵母表皮生長(zhǎng)因子受體3(抗原)Anti-GPR22 Antibody人抗類固生成抗體(SCA)

豇豆慢生根瘤菌雌激受體Anti-GPR27 Antibody人粒特異性抗核抗體(GS-ANA)

雞傷門(mén)氏菌雌激受體(多肽抗原)Anti-GPR32 Antibody人粒特異性抗核抗體(GS-ANA)

絲消旋德氏乳桿菌保加利亞亞種小鼠肝星形細(xì)胞

墨蝶蛉還原抗體醋菌人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞

嗅覺(jué)神經(jīng)相關(guān)蛋白STOML3抗體發(fā)根土壤桿菌(發(fā)根植物單胞菌)人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

尿轉(zhuǎn)運(yùn)型糖蛋白A2抗體植物乳桿菌人毛囊角質(zhì)細(xì)胞
FGFR4抑制劑(BLU-554)蘋(píng)果殼囊孢 1640液體培養(yǎng)基血清淀粉樣蛋白A

栗疫 溴紅結(jié)合珠蛋白;觸珠蛋白

霍亂弧 DMEM高糖液體培養(yǎng)基維生B12

大禿馬勃* 2-氟-5-甲溶

繩狀籃狀 (R)-3-吡咯烷Beclin1

長(zhǎng)裙竹蓀 異喹啉-5-磺微管相關(guān)蛋白輕鏈3II

嗜熱脂肪地芽孢桿 三氟甲磺基硅酯p62

雜色曲霉原變種 3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮脂肪

 曲霉 豬膽粉α-淀粉

野土地桿 1-(2-氨基乙基)胰蛋白

中瀨擲孢酵母 1-氨基-1-環(huán)己分泌型球蛋白A

金黃殼囊孢 水解酪蛋白(酪蛋白氨基)促腎上腺皮質(zhì)

谷棒桿 基硅乙酯輪狀病

大團(tuán)囊蟲(chóng)草 牛膽粉瘦

蕈狀芽孢桿 四苯基溴化膦饑餓

 


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