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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測(cè)試劑盒>>熒光PCR法>> 48T 0.1PCR管轉(zhuǎn)基因玉米品系MON87427核酸檢測(cè)試劑盒
對(duì)蝦黃頭病病毒(YHV)核酸定性檢測(cè)試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
轉(zhuǎn)基因玉米品系MON87427核酸檢測(cè)試劑盒 | 熒光探針法 | FS-P10749 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
鏈霉菌分類學(xué)及微生物藥物學(xué)的研究模式菌株: no表面土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 28℃
糙皮側(cè)耳(平菇)生長(zhǎng)條件: 25℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no
易變鏈霉菌培養(yǎng)基: 0012模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
臭曲霉生長(zhǎng)條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0015提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
銅綠假單胞菌生長(zhǎng)條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0051提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法
-1552℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
天山中慢生根瘤菌培養(yǎng)基: 0063模式菌株: no根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28-30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
ATCC53103培養(yǎng)基: 0006模式菌株: no種屬: Lactobacillus│rhamnosus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 37℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
伊平屋橋大洋芽孢桿菌大洋細(xì)菌模式菌株: no沉積物/多管沉積物(0-5cm)提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 28℃
鏈霉菌屬菌種抗真菌,抗金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌11、腸球菌模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0027生長(zhǎng)條件: 28C
DSM41685=ATCC21273=JCM5064=KCCS-1064Type strain. Produces plant antiviral agent 84-B-3模式菌株: yes種屬: Streptomyces│rameus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 0038生長(zhǎng)條件: 28℃
矢野口鞘氨醇菌生長(zhǎng)條件: 30℃培養(yǎng)基: 2提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-1553℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
植物乳桿菌培養(yǎng)基: 6模式菌株: no爛土豆提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 37℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
球菌分類學(xué)及嗜鹽微生物其它方面的研究模式菌株: no鹽礦沉積樣品提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 444生長(zhǎng)條件: 28℃
肺炎克雷伯氏菌培養(yǎng)基: 53模式菌株: no污泥提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
9-甲氧基喜樹堿Hpt/HP(haptoglobin) 結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗原Troponin T/c 心肌特異性肌鈣蛋白T抗體
鹽石蒜堿H-ras/Ras/Ras p21 peptide 原癌基因H-ras抗原Tropomyosin 原肌球蛋白1抗體
光甘草定HSTF2/HSF2 peptide 熱休克轉(zhuǎn)錄因子2抗原TROP2/TACD2 表面糖蛋白Trop2抗體(胰腺癌標(biāo)志物蛋白)
橙黃決明素BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 乳腺癌耐藥相關(guān)蛋白(抗原)Trop-2 原肌球蛋白抗體
荷葉堿Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS樣抑制因子3抗原Trk C 酪氨激酶C抗體(神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種)
鷹嘴豆芽素AHSP47(Heat shock protein-47) 熱休克蛋白-47抗原Trk B/NTRK2 酪氨激酶B抗體
10-羥基喜樹堿HSP-90 Alpha(Heat Shock Protein 90 Alpha ) 熱休克蛋白90α抗體Trk B/NTRK2 酪氨激酶B抗體
可可堿HSP-105 (heat sock protein-105) 熱休克蛋白HSP105抗原TrK A/NTRK1 酪氨激酶A抗體
D-松HtrA2/Omi peptide 絲氨蛋白酶/線粒體絲氨蛋白酶多肽抗原Trk A/B/C 酪氨激酶A/B/C抗體
常春藤皂苷元IAA/BSA 吲哚-3-乙偶聯(lián)牛血清白蛋白TRIP1/PSMC5 甲狀腺受體相互作用蛋白1抗體
轉(zhuǎn)基因玉米品系MON87427核酸檢測(cè)試劑盒Atazanavirsulfate 阿扎那韋硫鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR
Atazanavirsulfate 阿扎那韋硫鹽(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR
ImipenemandCilastatinSodium 亞胺培南-西司他丁鈉 質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR
Vinpocetine 長(zhǎng)春西丁,長(zhǎng)春西汀 質(zhì)量規(guī)格:>98%,ATP競(jìng)爭(zhēng)性的mTOR抑制劑
Phenytoinsodium 妥英鈉 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Oxcarbazepine 奧卡西平 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Oxcarbazepine 奧卡西平(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Hypericin 金絲桃素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
D-(+)-Glucopyranose6-phosphate D-葡萄糖-6-磷 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
D-Gluconate6-phosphate3sodiumsalt 6-磷葡萄糖三鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Azathioprine 硫唑嘌呤 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
BarnidipineHCl 鹽巴尼地平 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
CefepimeHydrochloride 鹽頭孢吡肟 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
CefepimeHydrochloride 鹽頭孢吡肟(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Loxoprofensodium 洛索洛芬鈉 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
PCR檢測(cè)試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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