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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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EGFR抑制劑(AZD3759)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-18 16:41:56瀏覽次數(shù):585次

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貨號(hào) FS-X10611
EGFR抑制劑(AZD3759)正在熱銷的產(chǎn)品:HCV-HCBP1/ACY-3(Hepatitis C virus core-binding protein 1) 型肝炎病核心蛋白結(jié)合蛋白-1(抗原)鄰溴苯 98%
HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病8抗原鄰溴苯 99%
HHV8/ORF K2/vIL-6(Human herpesvirus

中文名稱:EGFR抑制劑(AZD3759)

英文名稱:AZD3759

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號(hào):FS-X10611

產(chǎn)品介紹:

AZD3759是一種有效的可滲透中樞神經(jīng)系統(tǒng)的EGFR抑制劑。作用于EGFRwt,EGFRL858R和EGFRexon19Del,IC50分別為0.3,0.2和0.2nM。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號(hào):1626387-80-1

純度:99.61%

分子量:459.9

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

大腸埃希氏菌*Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCRIB Antibody環(huán)氧化合物水解3(EPHX3)

釀酒酵母Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SCRIB Antibody環(huán)腺二磷核糖水解(cADPRH)

馬克斯克魯維酵母Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SCRIB Antibody環(huán)前列腺受體(PTGIR)

熱吸水鏈霉菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC1 Antibody環(huán)加氧2(PTGS2)

節(jié)桿菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SCTR Antibody環(huán)加氧1(PTGS1)

嘴突凸臍蠕孢PE-CY5標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC1 Antibody環(huán)胍肽(CCP)

冷湖黃桿菌PE-Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC3 Antibody踝蛋白2(TLN2)

熱帶假絲酵母Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC4 Antibody(PB0464)踝蛋白(TLN)

產(chǎn)黃青霉PE標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDCBP Antibody滑行蛋白γ(TXLNγ)

地衣芽孢桿菌PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-SDHA Antibody滑行蛋白β(TXLNβ)

銅抗性鞘菌Cy3標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SDHA Antibody滑行蛋白α(TXLNα)

籃狀菌屬辣根過氧化物標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SDHA Antibody花生四烯脂加氧3(ALOXE3)

大豆慢生根瘤菌PE標(biāo)記的兔抗羊IgGAnti-SDHA Antibody花生四烯-5-脂加氧(ALOX5)

葡萄座腔菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗羊IgGAnti-SDHB Antibody花生四烯-15-脂加氧B(ALOX15B)

Brenneria nigrifluensPE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗羊IgGAnti-SDHB Antibody花生四烯-15-脂加氧(ALOX15)

黃曲霉Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-SDHC Antibody花生四烯-12-脂加氧(ALOX12)

神經(jīng)元X連鎖蛋白/兒童自閉癥相關(guān)蛋白抗體香菇(斜面)大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取物

神經(jīng)元Y連鎖蛋白抗體兒童自閉癥相關(guān)蛋白灰黃青霉大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物

神經(jīng)連接蛋白2抗體嗜根考克氏菌(藤黃八疊球菌)大鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞提取物

NIPA樣蛋白3抗體普通變形桿菌大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞提取物
EGFR抑制劑(AZD3759)醋桿屬 己乙酯雌酮

病研所芽孢桿 己乙酯馬烯雌酮

Marisediminicola Fmoc-L-谷γ芐酯促腎上腺皮質(zhì)

死亡谷芽孢桿 (1S,2R)-1-苯基-2-(1-吡咯烷基)-1-熱休克蛋白90

產(chǎn)朊假絲酵母 硫氧鈦-硫 水合物地塞松

釀酒酵母(有現(xiàn)成的) 三銅 水合物維生B1

總狀共頭霉 4-叔丁基苯天門冬氨基轉(zhuǎn)移

褐環(huán)乳牛肝 克羅拉濱天門冬氨基轉(zhuǎn)移

頂頭孢霉 6--7--7-脫氮血清淀粉樣蛋白A

大豆慢生根瘤 4-氨酰苯C-反應(yīng)蛋白

油菜核病 雙(2-甲基烯基)(1,5-環(huán)辛二烯)釕(II)結(jié)合珠蛋白

哈茨木霉 雙環(huán)辛烯化銠二聚體維生D

Actinophytocola 3,4-二甲氧基苯α1性糖蛋白

乳乳球乳亞種 (1,5-環(huán)辛二烯)二甲基鉑(II)γ谷氨酰轉(zhuǎn)移

膠紅酵母 4,4-二氟環(huán)己甲谷脫氫

 


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