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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
初級會(huì)員 | 第8年

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Nrf-2激活劑(Bardoxolone)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-18 16:44:56瀏覽次數(shù):207次

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貨號 FS-X10615
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Leptin 瘦(抗原)氧化鋁 AR
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Lumbrokinase 蚯蚓纖溶(蚓激抗原)氧化鋁 99.8%,10μm,,高白度
Livin (Inhibitors o

中文名稱:Nrf-2激活劑(Bardoxolone)

英文名稱:Bardoxolone

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10615

產(chǎn)品介紹:

Bardoxolone是一種新型核調(diào)節(jié)因子(Nrf-2)激活劑。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:218600-44-3

別名:CDDO;RTA 401

純度:99.21%

分子量:491.66

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

大腸埃希氏菌FITC標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SFTPD Antibody核糖體蛋白L6(RPL6)

豌豆根瘤菌FITC標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SFTPB Antibody核糖體蛋白L23A(RPL23A)

光帽鱗傘膠體金標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SFTPA1 Antibody核糖體蛋白L13A(RPL13A)

PX459 V2.0FITC標(biāo)記的兔抗人IgGAnti-SFTPA1/2 Antibody(PB0433)核糖激(RBKS)

異常畢赤酵母辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SGCA Antibody核糖核抑制因子(RI)

玫瑰黃鞘單胞菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SGK1 Antibody核糖核外切3(ERI3)

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-SGK1 Antibody核糖核外切2(ERI2)

大腸埃希氏菌PE標(biāo)記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-SGK1 Antibody核糖核外切1(ERI1)

野土地桿菌辣根過氧化物標(biāo)記兔抗人IgAAnti-SHANK3 Antibody核糖核T2(RNASET2)

魯酵母生物標(biāo)記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-SHBG Antibody核糖核P(RNASEP)

棒桿菌屬生物標(biāo)記的兔抗人IgGAnti-SHC1 Antibody核糖核L(RNASEL)

Bacillus aryabhattai生物標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-SHFM1 Antibody核糖核K(RNASEK)

釀酒酵母生物標(biāo)記的兔抗人分泌型IgAAnti-SHH Antibody核糖核H(RNASEH)

埃及枝頂孢生物標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SHC1 Antibody(PB0435)核糖核A9(RNASE9)

香草蘭根疾Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SHMT1 Antibody核糖核A8(RNASE8)

黃桿菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗人IgGAnti-SHISA7 Antibody核糖核A7(RNASE7)

核纖層蛋白A識別因子抗體Bacillussubterraneus大鼠膀胱上皮細(xì)胞提取物

中性鞘磷脂2抗體Helcococcuskunzii大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞提取物

核受體蛋白NR2E1抗體脫葉鏈霉菌大鼠心肌細(xì)胞提取物

N-乙基順丁烯二酰亞胺敏感融合蛋白抗體梭菌屬大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
Nrf-2激活劑(Bardoxolone)多形布勒擔(dān)子酵母 硅烷基 2,2-二氟-2-(氟磺酰)醋鹽媾疫錐蟲抗體

香菇(L988) 9-吖啶尼帕病抗體

地衣芽孢桿 2-氨基嘧啶-5-甲非酯化脂肪

盤長孢狀盤孢 5-降烯-2-羧馬心脂肪結(jié)合蛋白

蠟蚧 N-Boc-1-氨基環(huán)丁烷羧馬結(jié)合珠蛋白;觸珠蛋白

IBV M41 HAR/HI serum 陽性血清(荷蘭引進(jìn)) 4,6-二甲基二苯并噻吩輔肌動(dòng)蛋白α1

間型串珠鐮孢 納碳化鋯輔肌動(dòng)蛋白α2

昆明鏈霉 碳化鎢轉(zhuǎn)錄激活因子-1

蘇云金芽孢桿蘇云金亞種 碳化鈦(粉末)轉(zhuǎn)錄激活因子-2

根瘤 碳化鉭磷脂酰肌蛋白聚糖1

唐菖蒲青霉 碳化鈮磷脂酰肌蛋白聚糖4

冷變紫薄層 碳化鉿絡(luò)絲蛋白

粉紅單端孢霉 堿式碳銅緊密連接蛋白

就地堆肥地芽孢桿 硒化鉍(III)組織因子

克魯維畢赤酵母克魯維變種 五氧化三鈦組織因子途徑抑制物

 


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