當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>大鼠ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TcAMP大鼠環(huán)磷酸腺苷ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | cAMP大鼠環(huán)磷酸腺苷ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Rat cyclic adenosine monophosphate, cAMP Elisa Kit |
貨號 | FS-R64649 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因GDIA1抗體英文全稱luteinizing hormone receptor英文簡稱LHR檢測范圍4388nmol/L-8ng/mL
乙二醛酶1抗體英文全稱Interleukin 17D英文簡稱IL-17D檢測范圍4389nmol/L-50pg/mL
核呼吸因子2抗體英文全稱Matrix Gla Protein英文簡稱MGP檢測范圍4390nmol/L-2000pg/ml
細(xì)胞樣蛋白1樣蛋白抗體英文全稱βcross linked C-opeptide of type I collagen 英文簡稱β-CTX檢測范圍4391nmol/L-8ng/mL
γ1氨丁酸受體GABAA Rβ1抗體英文全稱Dehydroepiandrosterone sulfate英文簡稱DHEA-S檢測范圍4392nmol/L-1000ng/ml
干擾素/維甲酸誘導(dǎo)凋亡相關(guān)因抗體英文全稱Poly (ADP-ribose)polymerase 1英文簡稱PARP1檢測范圍4393nmol/L-2000pg/ml
磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體英文全稱15S-hydroeicosatetraenoic acid英文簡稱15S-HETE檢測范圍4394nmol/L-8ng/ml
磷酸化接頭蛋白Gab2抗體英文全稱15-hydroeicosatetraenoic acid英文簡稱15-HETE檢測范圍4395nmol/L-2000pg/ml
甘油激酶3抗體英文全稱Eotaxin 2英文簡稱CCL24檢測范圍4396nmol/L-10ng/mL
半乳糖激酶1抗體英文全稱Bone morphogenetic protein 1英文簡稱BMP-1檢測范圍4397nmol/L-5000pg/ml
糖原蛋白2抗體英文全稱Hepatitis A virus IgG Antibody英文簡稱HAV-IgG檢測范圍4398nmol/L-
磷酸半乳糖尿苷酸轉(zhuǎn)移酶1抗體英文全稱coagulation factor Ⅲ英文簡稱FⅢ檢測范圍4399nmol/L-640pg/mL
糖原蛋白1抗體英文全稱Cytokeratin 18-M65英文簡稱CK 18-M65檢測范圍4400nmol/L-8ng/mL
葡萄糖合成酶2抗體英文全稱Ketoglutaric acid英文簡稱KA檢測范圍4401nmol/L-12ng/ml
谷草轉(zhuǎn)氨酶2抗體英文全稱13-S-hydroxyoctadecadienoic acid英文簡稱13-S-HODE檢測范圍4402nmol/L-10ng/ml
葡萄糖-6磷酸脫氫酶抗體英文全稱hypoxia-inducible factor α英文簡稱HIF-α檢測范圍4403nmol/L-40pg/mL
人可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)ELISA試劑盒HER2/ErbB2 (44E7) Mouse mAb100 ul
人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒Phospho-HER2/ErbB2 (Tyr1221/1222) Antibody100 ul
人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒c-Fos (9F6) Rabbit mAb100 ul
人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒FosB (5G4) Rabbit mAb20 ul
人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒FosB (5G4) Rabbit mAb100 ul
人可溶性白細(xì)胞抗原G(sHLA-G)ELISA試劑盒PRMT5/Skb1Hs Methyltransferase Antibody100 ul
人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)ELISA試劑盒Toll-like Receptor 9 Antibody100 ul
人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)ELISA試劑盒EGF Receptor (EGFR1) Mouse mAb (IP Specific)100 ul
cAMP大鼠環(huán)磷酸腺苷ELISA試劑盒實驗原理Hib乙酰輔酶A水解酶抗體Tiopronin別名: 分子式: C5H9NO3S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
腫瘤異常甲化蛋白1抗體Loratadine別名: 分子式: C22H23ClN2O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
腫瘤異常甲化蛋白2抗體Finasride別名: 分子式: C23H36N2O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰羥化酶4抗體2-Amino-3,5-dibromobenzaldehyde別名: 分子式: C7H5Br2NO性狀: Yellow powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
人內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病膜糖蛋白2抗體1-(2-Chloroacetyl)pyrrolidine-2-carbonitrile別名: 分子式: C7H9ClN2O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
Beta氨己糖苷酶beta亞蛋白B鏈抗體bipenem pivoxil別名: 分子式: C22H31N3O6S2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
HEXIM2蛋白抗體Diclofenac sodium別名: 分子式: C14H10Cl2NNaO2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
3'-5'外切酶1蛋白抗體N-(2-Methyl-5-nitrophenyl)-4-(pyridin-3-yl)pyrimidin-2-amine別名: 分子式: C16H13N5O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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