當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T基質(zhì)金屬蛋白酶2ELISA試劑盒
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
基質(zhì)金屬蛋白酶2ELISA試劑盒 | matrix metalloproteinase 2 | FS-P65355 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
熱休克蛋白90α抗體產(chǎn)品別名: 三氟乙酰賴氨落花生枝葉(標(biāo)準(zhǔn)品)
肝源性纖維蛋白原相關(guān)蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 乙烯雙茚二化鋯, 外消旋混合物落新婦苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
紅分化相關(guān)因蛋白抗體產(chǎn)品別名: 3-氨-5-苯噻吩-2-甲甲酯麻楓樹酚酮B(標(biāo)準(zhǔn)品)
同源異型盒因HOXA13抗體產(chǎn)品別名: 氧化白藜蘆(草)(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化組蛋白去乙?;?/font>4(Ser246)抗體產(chǎn)品別名: 扁豆堿(中)(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化組蛋白去乙酰化酶7抗體產(chǎn)品別名: L-谷氨 1-甲酯根(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化組蛋白去乙?;?/font>4抗體產(chǎn)品別名: 白皮杉麻醉椒苦素
磷化組蛋白去乙酰化酶7抗體產(chǎn)品別名: 白藜蘆麻醉椒素
HIRA相互作用蛋白3抗體產(chǎn)品別名: 美曲勃龍(R-1881)馬鞭草(標(biāo)準(zhǔn)品)
HOOK1蛋白抗體產(chǎn)品別名: 尼泊金異酯馬勃(標(biāo)準(zhǔn)品)
人類免疫缺陷病2型/2型艾滋病病gp41+gp160抗體產(chǎn)品別名: L-亮氨-4-鹽鹽馬齒莧(標(biāo)準(zhǔn)品)
人類免疫缺陷病2型/2型艾滋病病gp41+gp160抗體產(chǎn)品別名: 鬼臼素馬兜鈴(北馬兜鈴)(標(biāo)準(zhǔn)品)
HCG3蛋白抗體產(chǎn)品別名: 四苯醌馬兜鈴A(標(biāo)準(zhǔn)品)
HER4抗體產(chǎn)品別名: (R)-5-氧代四-3-氨芐酯馬兜鈴C
肝素結(jié)合性表皮生長因子抗體產(chǎn)品別名: (R)-3-氨-Y-丁內(nèi)酯鹽鹽馬兜鈴D
基質(zhì)金屬蛋白酶2ELISA試劑盒Human PROCA1 (Protein PROCA1) ELISA KIT葉生布勒擔(dān)子酵母拉丁屬名: Bulleribasidium foliicola
Human R3HDML (Peptidase inhibitor R3HDML) ELISA KIT谷氨棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
Human PPP1R13B (Apoptosis-stimulating of p53 protein 1) ELISA KIT大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
Human POMK (Protein O-mannose kinase) ELISA KIT柔嫩艾美耳球蟲拉丁屬名: tenella
Human PKN1 (Serine/threonine-protein kinase N1) ELISA KITMethylobacterium variabile拉丁屬名: Methylobacterium variabile
Human METRN(Meteorin) ELISA Kit金耳注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human PPP2R4(Serine/threonine-protein phosphatase 2A activator) ELISA KitDB (彌漫大B淋巴瘤) (通過STR鑒定)拉丁屬名: DB (彌漫大B淋巴瘤)
Human PPME1 (Protein phosphatase methylesterase 1) ELISA KIT炭疽芽胞桿菌拉丁屬名: anthracis
Human PSKH1 (Serine/threonine-protein kinase H1) ELISA KIT*蛹蟲草注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human PTH1R(PaRathyroid hormone/paRathyroid hormone-related peptide receptor) ELISA Kit離中不粘柄菌拉丁屬名: Asticcacaulis excentricus
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