SNP土壤中性磷酸酶檢測試劑盒微量法-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-01S63719

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規(guī)格：100管/96樣

檢測方法：微量法

貨號：FS-01S63719
商品介紹：

測定意義

土壤磷酸酶是催化土壤有機磷礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性，是評價土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強度的指標。磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的顯著影響，根據(jù)最適PH范圍，一般把土壤磷酸酶分為中性、酸性和堿性三種類型。

測定原理：

中性環(huán)境中，S-NP催化磷酸苯二鈉水解生成苯和磷酸氫鈉，通過測定酚的生成量即可計算出NP活性。

自備儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水、乙醇和甲苯。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提取：

1、細胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細胞：先收集細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

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大鼠白活化黏附因子(ALCAM)試劑盒 Human CHKB (Choline/ethanolamine kinase) ELISA KIT磷化粘著斑激抗體

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大鼠血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)試劑盒 Human CENPT (Centromere protein T) ELISA KITFAM134B蛋白抗體

大鼠髓鞘相關糖蛋白(MAG)試劑盒 Human CDCA7L (Cell division cycle-associated 7-like protein) ELISA KIT磷化范可尼貧血組蛋白A抗體

大鼠胎球蛋白A(FETUA)試劑盒 Human CGREF1 (Cell growth regulator with EF hand domain protein 1) ELISA KIT范可尼綜合征相關蛋白FANCC抗體

大鼠Dickkopf相關蛋白3(DKK3)試劑盒Human CHKA (Choline kinase alpha) ELISA KITFXYD離子轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子6抗體

大鼠血管緊張轉(zhuǎn)化2(ACE2)試劑盒 Human CHKB (Choline/ethanolamine kinase) ELISA KITFyn結(jié)合蛋白抗體

大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGE)試劑盒 Human CHPT1 (Cholinephosphotransferase 1) ELISA KIT鋅指蛋白FYCO1抗體

大鼠胰島降解(IDE)試劑盒Human CNTLN (Centlein) ELISA KITFYTTD1蛋白抗體

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大鼠總膽汁(TBA)試劑盒 Human CENPT (Centromere protein T) ELISA KIT巖藻糖轉(zhuǎn)移11抗體

大鼠新蝶呤 (Neopterin)試劑盒 Human CENPV (Centromere protein V) ELISA KIT干擾誘導蛋白15抗體

大鼠CD4分子(CD4)試劑盒Human ABCA1(ATP-binding cassette sub-family A member 1) ELISA KitP38相互作用蛋白抗體

大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)試劑盒 Human CHEK1 (Serine/threonine-protein kinase Chk1) ELISA KIT鈣粘樣蛋白28抗體
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