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人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;TE671 Subline No.2
貨號 | AXB6464 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | MOR/CPR人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | 貨號 | AXB6464 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | MOR/CPR |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
細(xì)胞凍存注意事項:
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候,這時細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Ai-mucin-1/Muc-1/CD227 /FITC 熒光素標(biāo)記粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Ai-UCP-3/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白3抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
ABL1抗體 Ai-ABL1 0.1ml
Mouse Ai-rabbit IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
phospho-GSK3 Alpha(Ser21) 英文名稱: 0酸化糖原合酶激酶-3α抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh PRSS3 腦3抗體 規(guī)格 0.2ml
Ai-UCP-3/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白3抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Ai-GRO Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗生長調(diào)節(jié)致癌基因α抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Ai-p53BP1/53BP1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠p53結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh beta Bax/BCL2 associated X protein BCL2相關(guān)X蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
AMH/MIS Muellerian抑制因子抗原 1mg
phospho-GSK3 Alpha + Beta (Tyr279+Tyr216) 英文名稱: 0酸化糖原合酶激酶3α/β抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh RanBP3 RAN結(jié)合蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml
Ai-p53BP1/53BP1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠p53結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Ai-L-enk/FITC 熒光素標(biāo)記抗亮腦啡肽抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Ai-Snake poison Protein/FITC 熒光素標(biāo)記抗蛇毒蛋白抗體(中華眼鏡蛇)IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh AKT2 蛋白激酶B2 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Ai-horse IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
Phospho-GSK3 alpha (Ser21) 英文名稱: 0酸化糖原合酶激酶3α抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh Rabbit Ai-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
Ai-Snake poison Protein/FITC 熒光素標(biāo)記抗蛇毒蛋白抗體(中華眼鏡蛇)IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Ai-MAP-2/FITC 熒光素標(biāo)記微管相關(guān)蛋白2抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Ai-T7 tag/FITC 熒光素標(biāo)記T7 tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh ADAMTS1 整合素樣金屬蛋白酶與酶1型抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Ai-chicken IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗雞IgM 0.1ml
phospho-Gria2 (Ser880) 英文名稱: 0酸化谷酸受體2抗體 0.1ml
MOR/CPR人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞Rhesus aibody Rh Rabbit Ai-Bovine IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗IgM 規(guī)格 0.1ml
Ai-T7 tag/FITC 熒光素標(biāo)記T7 tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Ai-Phospho-MK6 (Ser207)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化原活化蛋白激酶MKK6抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Ai-TRAF2/TNF-R2 /FITC 熒光素標(biāo)記壞死因子受體相關(guān)因子2抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh ABHD4 α/β水解酶4抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Ai-Avidin/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗親和素 2ml
Phospho-GRB10 (Tyr67) 英文名稱: 0酸化生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh RAB8B ras癌基因家族RAB8B抗體 規(guī)格 0.2ml
Ai-TRAF2/TNF-R2 /FITC 熒光素標(biāo)記壞死因子受體相關(guān)因子2抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
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