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ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | EndoglinELISA試劑盒免費代測 |
英文名稱 | ENG;CD105 |
貨號 | FS-P64864 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
酪氨酸激酶A/B/C抗體英文全稱liver type fatty acid binding protein英文簡稱L-FABP檢測范圍8692nmol/L-6000pg/mL
凝血調(diào)節(jié)蛋白/血栓調(diào)節(jié)素抗體英文全稱Sterol Regulatory Element Binding proteins 1C英文簡稱SREBP-1C檢測范圍8693nmol/L-200ng/mL
腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體英文全稱mammalian target of rapamyein C1英文簡稱mTORC1檢測范圍8694nmol/L-100pg/mL
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體英文全稱Protein Kinase AMP Activated Alpha英文簡稱AMPKa檢測范圍8695nmol/L-5000pg/mL
端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶抗體英文全稱S6K英文簡稱S6K檢測范圍8696nmol/L-24U/L
G蛋白偶聯(lián)受體TAS1R3抗體英文全稱4 E binding protein 1英文簡稱4EBP1檢測范圍8697nmol/L-8ng/ml
腫瘤細胞調(diào)亡素/死亡受體5抗體英文全稱glucocorticoid英文簡稱GC檢測范圍8698nmol/L-24ng/mL
環(huán)指蛋白92抗體英文全稱phospho-extracellular signal-regulated kinase英文簡稱pERK檢測范圍8699nmol/L-2000pg/ml
環(huán)指蛋白調(diào)節(jié)蛋白激酶C蛋白抗體英文全稱Transglutaminase英文簡稱TG檢測范圍8700nmol/L-400U/L
TRIM50蛋白抗體英文全稱diacylglycerol acyltransferase1英文簡稱DGAT1檢測范圍8701nmol/L-80U/L
環(huán)指蛋白88抗體英文全稱diacylglycerol acyltransferase2英文簡稱DGAT2檢測范圍8702nmol/L-60U/L
鋅指蛋白抑制NFκB蛋白抗體英文全稱glycerol-3-phosphate O-acyltransferase英文簡稱GPAT檢測范圍8703nmol/L-2000pg/mL
環(huán)指蛋白98抗體英文全稱neurokinin A英文簡稱NKA檢測范圍8704nmol/L-20ng/mL
端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體英文全稱Phosphofructokinase 6英文簡稱PFK-6檢測范圍8705nmol/L-100U/L
生精細胞凋亡相關(guān)因6抗體英文全稱NaPi-IIb英文簡稱NaPi-IIb檢測范圍8706nmol/L-20ng/mL
轉(zhuǎn)移生長因子β受體3抗體(TGF-βRⅢ,TGFβRⅢ)英文全稱p38 mitogen activated protein kinases英文簡稱p38MAPK檢測范圍8707nmol/L-320U/L
干擾素α(IFNα)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Phospho-Cyclin B1 (Ser133) (9E3) Rabbit mAb100 ul
干擾素α(IFNα)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Phospho-Stat4 (Tyr693) (D2E4) Rabbit mAb100 ul
干擾素α(IFNα)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Cyclin B1 (V152) Mouse mAb100 ul
干擾素α(IFNα)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Phospho-Cyclin E1 (Thr62) Antibody100 ul
干擾素α(IFNα)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)MTHFD2 (D8W9U) Rabbit mAb100 ul
干擾素α(IFNα)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Phospho-HSL (Ser565) Antibody20 ul
干擾素α(IFNα)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Phospho-HSL (Ser565) Antibody100 ul
干擾素α(IFNα)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Cyclin B1 Antibody20 ul
EndoglinELISA試劑盒免費代測兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Bacillus subtilis
鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA Kit,48T/96T 用途: 食用、藥用
人脫氧吡酚/脫氧吡啉(DPD)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Gluconacetobacter xylinus
鼠脫氧吡酚/脫氧吡啉(DPD)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大鼠脫氧吡酚/脫氧吡啉(DPD)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔子脫氧吡酚/脫氧吡啉(DPD)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: typhimurium
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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