當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96T活化蛋白CELISA試劑盒免費(fèi)包郵
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
活化蛋白CELISA試劑盒免費(fèi)包郵 | activated protein C | FS-P65329 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
調(diào)節(jié)蛋白GAL4抗體產(chǎn)品別名: 六乙亞磷紅景天素;草質(zhì)素甙;
配子生成素結(jié)合蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 碳鋯銨紅芪(標(biāo)準(zhǔn)品)
鋅指蛋白403/喉癌相關(guān)蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 3-巰-2-甲戊紅曲(特殊發(fā)酵)(標(biāo)準(zhǔn)品)
鳥苷環(huán)化酶α2/GCS-α-2抗體產(chǎn)品別名: GNF-2葒草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
G蛋白偶聯(lián)受體7抗體產(chǎn)品別名: 3-巰-2-甲-1-戊厚樸(厚樸)(標(biāo)準(zhǔn)品)
糖磷脂酰肌錨連接蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 3-溴苯甲酰厚樸酚(標(biāo)準(zhǔn)品)
3-磷甘油酰轉(zhuǎn)移酶2抗體產(chǎn)品別名: 5-甲水楊甲酯厚樸總酚(對照品)
G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體產(chǎn)品別名: 4--2-羥苯甲甲酯胡薄荷酮;長葉薄荷酮
富含GC啟動(dòng)子結(jié)合蛋白1/血管壁相連蛋白抗體產(chǎn)品別名: Ataluren (PTC124)胡黃連(標(biāo)準(zhǔn)品)
血管壁相連蛋白樣蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 4-甲-2-巰苯并噻唑胡黃連苷 II(標(biāo)準(zhǔn)品)
G蛋白偶聯(lián)受體151抗體產(chǎn)品別名: 3-磺酰-4-氟苯甲胡黃連苷 III(標(biāo)準(zhǔn)品)
G蛋白偶聯(lián)受體77抗體產(chǎn)品別名: 4-苯磺酰脲胡黃連苷IV
精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白Rab GDI α抗體產(chǎn)品別名: β-內(nèi)啡肽,鼠胡黃連苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)
甘油磷二酯酶磷結(jié)構(gòu)域4抗體產(chǎn)品別名: 2,5-二氟苯胡椒(白胡椒)(標(biāo)準(zhǔn)品)
D-果糖6磷轉(zhuǎn)移酶2抗體產(chǎn)品別名: 甲烯十二氟庚酯胡椒(黑胡椒)(標(biāo)準(zhǔn)品)
活化蛋白CELISA試劑盒免費(fèi)包郵Human SKI (Ski oncogene) ELISA KIT禾谷鐮孢*拉丁屬名: Fusarium graminearum
Human HMGA2(High mobility group protein HMGI-C) ELISA Kit大豆慢生根瘤菌用途: 耐受pH4.5
Human WDTC1 (WD and tetratricopeptide repeats protein 1) ELISA KIT枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Human CHIT1(Chitotriosidase-1) ELISA Kit黃桿菌屬拉丁屬名: Flavobacterium flevense
Human UXS1 (UDP-glucuronic acid decarboxylase 1) ELISA KIT青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human UFL1 (E3 UFM1-protein ligase 1) ELISA KIT枯草芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human WDSUB1 (WD repeat, SAM and U-box domain-containing protein 1) ELISA KIT綠僵菌用途: 害蟲生物防治
Human TAT (Tyrosine aminotransferase) ELISA KIT熱帶假絲酵母拉丁屬名: Candida tropicalis
Human WRAP73 (WD repeat-containing protein WRAP73) ELISA KIT爪哇毛霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human URGCP (Up-regulator of cell proliferation) ELISA KIT嗜腐爛居真菌細(xì)菌拉丁屬名: Mycetocola saprophilus氧化酶ELISA試劑盒
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