ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1抗體（神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白PC4）Goat Anti-Chicken IgG  羊抗雞IgG          （親和層析純化）β-巰乙，半胱 白介素33(IL33)ELISA試劑盒

抑制凋亡樣蛋白2抗體Goat Anti-HSA  羊抗人血清白蛋白   （親和層析純化）白介素32(IL32)ELISA試劑盒

干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體Goat Anti-human Fibrinogen  羊抗人纖維蛋白原   （親和層析純化）(標(biāo)準(zhǔn)品)白介素31(IL31)ELISA試劑盒

干擾素誘導(dǎo)蛋白44抗體Goat Anti-human IgA  羊抗人IgA          （親和層析純化）地紅霉素白介素3(IL3)ELISA試劑盒

5-三磷肌受體3抗體Goat Anti-human IgG  羊抗人IgG          （親和層析純化）地紅霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）白介素2受體β(IL2Rβ)ELISA試劑盒

干擾素omega 1蛋白抗體Goat Anti-human IgM  羊抗人IgM          （親和層析純化）17,21-二倍他米松酯白介素2受體α(IL2Rα)ELISA試劑盒

干擾素alpha 7蛋白抗體Mouse Anti-human IgG  小鼠抗人IgG        （親和層析純化）對稱N,N-二精氨白介素29(IL29)ELISA試劑盒

干擾素β抗體Mouse Anti-human IgM  小鼠抗人IgM        （親和層析純化）頭孢唑肟鈉白介素28受體(IL28R)ELISA試劑盒

DNA結(jié)合抑制因子1抗體Mouse Anti-Goat IgG  小鼠抗羊IgG        （親和層析純化）頭孢唑肟鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)白介素28B(IL28B)ELISA試劑盒

γ干擾素誘導(dǎo)蛋白202抗體Mouse Anti-goat IgM  小鼠抗羊IgM        （親和層析純化）焦性沒食子,鄰三酚,焦棓白介素28A(IL28A)ELISA試劑盒

腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體Mouse Anti-rabbit IgG  小鼠抗兔IgG        （親和層析純化）曲美替尼白介素27(IL27)ELISA試劑盒

生長抑制因子因1抗體Mouse Anti-Rabbit IgM  小鼠抗兔IgM        （親和層析純化）鹽索他洛爾白介素26(IL26)ELISA試劑盒

白介素8抗體Mouse Anti-rat IgG  小鼠抗大鼠IgG      （親和層析純化）H-89(PKA抑制劑)白介素25(IL25)ELISA試劑盒

整合素連接激酶-1抗體Mouse Anti-rat IgM  小鼠抗大鼠IgM      （親和層析純化）夫西地白介素23受體(IL23R)ELISA試劑盒

磷化KB抑制蛋白激酶α抗體Mouse Anti-Bovine IgG  小鼠抗牛IgG        （親和層析純化）夫西地(標(biāo)準(zhǔn)品)白介素23(IL23)ELISA試劑盒
胰島素樣生長因子1撫生ELISA試劑盒Anti-LBP Antibody翹鱗傘拉丁屬名: Pholiota squarrosa

Anti-LBR Antibody熱帶假絲酵母拉丁屬名: Candida  tropicalis

Anti-LBP Antibody棒桿菌屬拉丁屬名: Corynebacterium  sp.

Anti-LCAT Antibody巴西果小克銀漢霉拉丁屬名: Cunninghamella bertholletiae

Anti-LCAT Antibody片球菌屬拉丁屬名: Pediococcus sp.

Anti-LBP Antibody水管致黑棲熱菌拉丁屬名: Thermus scotoductus

Anti-LCAT Antibody爪哇青霉拉丁屬名: Penicillium javanicum

Anti-L1 Antibody紫色紅曲拉丁屬名: Monascus  purpureus

Anti-L2 Antibody大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli

Anti-LCK Antibody釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces Cerevisiae
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)