當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>小鼠ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TEL小鼠內(nèi)皮脂肪酶ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | EL小鼠內(nèi)皮脂肪酶ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Mouse Endothelial lipase, EL Elisa Kit |
貨號 | FS-M64369 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
雙特異性蛋白磷酶26抗體(絲裂原活化蛋白激酶磷酶8)Trigoxyphin A別名: 分子式: C34H34O9性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 活性;劍葉三寶木;瑞香烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
阿米洛利結(jié)合蛋白1抗體Rediocide C別名: 分子式: C46H54O13性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 瑞香烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
S期激酶活化蛋白DBF4A抗體Abiesadine I別名: 分子式: C24H34O5性狀: Powder純度: 96.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 松香烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
著絲粒相關(guān)蛋白DSN1抗體Rediocide A別名: 分子式: C44H58O13性狀: Powder純度: 97.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 瑞香烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
雙皮層蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白DCDC2抗體Pimaric acid別名: Dextropimaric acid分子式: C20H30O2性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 松屬;海松烷;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
神經(jīng)干樹突調(diào)節(jié)蛋白DAGLα抗體15,18-Dihydroxyabieta-8,11,13-trien-7-one別名: 分子式: C20H28O3性狀: Powder純度: 93.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 日本落葉松;松香烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
對接蛋白4抗體ent-6α,9α-Dihydroxy-15-oxokaur-16-en-19-oic acid β-D-glucopyranosyl esr別名: 分子式: C26H38O10性狀: Powder純度: 97.5%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 貝殼杉烷;二萜苷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
DULLARD蛋白抗體18-Norabieta-8,11,13-triene-4,15-diol別名: 分子式: C19H28O2性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 松屬;松香烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
EL小鼠內(nèi)皮脂肪酶ELISA試劑盒實驗原理G蛋白偶聯(lián)受體49抗體Monkey Pro-MMP-13 (Pro-Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit
DNA復制抑制因子抗體Monkey BMP-15 (Bone Morphogenetic Protein 15) ELISA Kit
G蛋白α抑制蛋白2抗體Monkey NES1 (Nesfatin 1) ELISA Kit
G蛋白偶聯(lián)受體γ4抗體Monkey IGF1R (Insulin Like Growth Factor 1 Receptor) ELISA Kit
G氨基丁B型受體2抗體Monkey FPA (Fibrinopeptide A) ELISA Kit
葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗體(熱休克蛋白70蛋白5)Monkey CBX3 (Chromobox Homolog 3) ELISA Kit
葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94抗體Monkey TAB (Thyroxine Antibody) ELISA Kit
糖原合酶激酶-3β抗體Monkey PDIA3 (Protein Disulfide Isomerase A3) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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