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| 貨號 | FS-X11005 |
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產(chǎn)品介紹:
Nelarabine(Arranon,506U78)是嘌呤核苷酸類似物，為DNA合成抑制劑，對腫瘤細胞的IC50為0.067-2.15μM，可作用于T細胞急性淋巴細胞白血病。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：121032-29-9 別名：506U78;GW 506U78;Nelzarabine 純度：98.0% 分子量：297.27 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱：DNA合成抑制劑（Nelarabine）
英文名稱：Nelarabine
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X11005
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
鼠傷門氏菌Rhizobium leguminosarum大鼠己糖激(HK)
蘇云金芽胞桿菌尼日利亞亞種Rhizobium leguminosarum大鼠糖原合成激(GSK)
解脂假絲酵母Rhizobium leguminosarum大鼠糖原合成激(GSK)
鞘單胞菌屬Rhizobium leguminosarum大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)
弗雷德里克斯堡假單胞菌Rhizobium leguminosarum大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)
繡色土生單胞菌Rhizobium leguminosarum大鼠高敏狀腺原(u-T3)
牛肝菌Rhizobium leguminosarum大鼠高敏狀腺原(u-T3)
大腸埃希菌Rhizobium leguminosarum大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)
芽孢桿菌Rhizobium leguminosarum大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)
海水球菌Rhizobium leguminosarum大鼠胱天蛋白9(Casp-9)
孢籃狀菌Rhizobium leguminosarum大鼠胱天蛋白9(Casp-9)
白黃阮繼生氏菌Rhizobium leguminosarum大鼠阿立新A(Orexin A)
彎孢Rhizobium leguminosarum大鼠阿立新A(Orexin A)
異常威克漢姆酵母Rhizobium leguminosarum大鼠胱天蛋白3(Casp-3)
糙卷霉Rhizobium leguminosarum大鼠胱天蛋白3(Casp-3)
類食品乳桿菌Rhizobium leguminosarum大鼠B淋巴瘤因子2(Bcl-2)
G蛋白偶合受體激2抗體土壤三線鐮孢小鼠誘導(dǎo)型多能干細胞（iPS細胞）OSK-1（干細胞庫保藏）
蛋白激N2抗體粘帚霉屬小鼠胚胎干細胞（干細胞庫保藏）
乳腺癌易感基因相關(guān)蛋白2四孢脈孢菌小鼠胚胎干細胞G-Olig2（干細胞庫保藏）
T淋巴細胞凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體殼青霉小鼠胚胎干細胞C57BL/6（干細胞庫保藏）
DNA合成抑制劑（Nelarabine）大腸埃希 表莪術(shù)呋喃烯酮
谷棒桿 鮮酯
拉氏棲鹽湖 11-巰基十一烷
少孢酵母 4-表-莪術(shù)
熱帶假絲酵母 焦磷鐵
黑曲霉 旋覆花內(nèi)酯
黑曲霉 十二烷基苯磺鈣
傳染性牛鼻氣管炎病
鍺栓孔 硫鳥
雜色曲霉 1beta-羥基土木香內(nèi)酯
蠟狀芽孢桿 異山梨
ATCC 9006 1-(2,6-二)羥
大腸埃希
稻生擲孢酵母 2--4
橙灰緊旋鏈霉 前胡E
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