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TRAIL誘導(dǎo)劑(Akt和ERK活性抑制劑)(TIC10)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-20 16:26:45瀏覽次數(shù):170次

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貨號 FS-X10664
TRAIL誘導(dǎo)劑(Akt和ERK活性抑制劑)(TIC10)正在熱銷的產(chǎn)品:PIIICP 大鼠III型前膠原肽(C端)對苯 CP,97%
PIIINP 大鼠III型前膠原肽(N端)4-芐 99%
Collagen IV 大鼠IV型膠原鄰苯 standard for GC,≥99.5% (GC)
Collagen VI 大鼠VI型膠原鄰苯 AR,98%
HA 大鼠透明質(zhì)鄰苯 99%
LN

中文名稱:TRAIL誘導(dǎo)劑(Akt和ERK活性抑制劑)(TIC10)

英文名稱:TIC10

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

貨號:FS-X10664

產(chǎn)品介紹:

TIC10是一種有效的TRAIL誘導(dǎo)劑,也抑制Akt和ERK活性。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:1616632-77-9

別名:ONC-201

純度:99.68%

分子量:386.49

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

海泥黃桿菌APC標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-ZP1 Antibody成纖維生長因子17(FGF17)

德氏鏈霉菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-ZP3 Antibody成纖維生長因子13(FGF13)

腐皮鐮孢Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-ZP2 Antibody成纖維生長因子12(FGF12)

夏威夷平臍蠕孢Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗水貂IgGBrdU成纖維生長因子11(FGF11)

Chryseobacterium vietnamense Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-β-catenin Antibody成纖維激活蛋白α(FAPα)

新疆糖絲菌PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-ZWINT Antibody成神經(jīng)瘤抑制瘤變蛋白1(NBL1)

海綿假單胞菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-β-catenin Antibody成肌分化蛋白(MyoD)

鞘菌屬堿性磷(AP)標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-FXR2(Human) pAb成簇蛋白(TUFT)

喬治亞青霉FITC標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-EIF4G2(Human/Mouse) pAb沉默調(diào)節(jié)蛋白7(SIRT7)

強雄腐霉羅丹明標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-β-catenin Antibody沉默調(diào)節(jié)蛋白6(SIRT6)

大彎桿菌膠體金標(biāo)記的兔抗水貂IgGAnti-KHDRBS1(Human) pAb沉默調(diào)節(jié)蛋白5(SIRT5)

粉紅聚端孢羅丹明標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-PABPN1(Human) pAb沉默調(diào)節(jié)蛋白4(SIRT4)

大腸埃希氏菌(大腸桿菌)膠體金標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SLC3A1(rBAT)(Human) pAb沉默調(diào)節(jié)蛋白3(SIRT3)

產(chǎn)黃青霉FITC標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SLC7A4(CAT4)(Human) pAb沉默調(diào)節(jié)蛋白2(SIRT2)

Erythrobacter pelagi 堿性磷(AP)標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SLC43A1(LAT3)(Human) pAb沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)

季也蒙假絲酵母辣根過氧化物標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SLC22A5(OCTN2)(Human) pAb巢蛋白2(NID2)

腫瘤抑制基因PHLPP抗體白色噬瓊膠菌大鼠心肌組織提取物

脯脫氫抗體鼠李糖乳桿菌大鼠腸靜脈組織提取物胞

原鈣粘蛋白12抗體噬糖鹽紅菌大鼠胃粘膜組織提取物

造血干細(xì)胞抗原CD133相關(guān)蛋白抗體師崗鏈霉菌大鼠小腸粘膜組織提取物
TRAIL誘導(dǎo)劑(Akt和ERK活性抑制劑)(TIC10)狹窄革 半胱蛋白6

耐鹽枝孢 半胱蛋白7

巨枝膝梗孢 5-溴-2-氟苯甲半胱蛋白9

蠟葉曲霉 甲酰苯色C

異常威克漢姆酵母 順-1,2,3,6-四氫鄰苯二甲酐B瘤因子2

根瘤 (±)-1-苯基-1,2-乙二Bcl-2相關(guān)X蛋白

青變色鏈霉 1-苯鈣蛋白

多色節(jié)桿 6--2-甲鈣蛋白抑

季也蒙邁耶氏酵母 3,4-二甲氧基I型膠原

釀酒酵母 2-甲酰結(jié)核病抗體

嬰兒芽胞桿 (-)-4,5-雙[羥基(二苯基)甲基]-2,2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)脂肪結(jié)合蛋白4

新疆鹽地桿 7-甲基敏感性脂肪

煙曲霉 2-甲氧基呼吸道合胞體病抗體

硬結(jié)節(jié)桿 5-氨基傳染性鼻氣管炎病抗體

季也蒙假絲酵母 鄰甲苯基溴化鎂溶液副流感3型抗體

 


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