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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TMTL小鼠胃動(dòng)素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | MTL小鼠胃動(dòng)素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Mouse Motilin, MTL Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-M64371 |
公司產(chǎn)品僅用于科研ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
背神經(jīng)管核蛋白抗體Hedychenone別名: 15,16-Epoxy-7,11,13(16),14-labdatraen-6-one分子式: C20H26O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 活性;草果藥;滇姜花;半日花烷;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
雙甲基精氨水解酶1抗體ent-9-Hydroxy-15-oxokauran-19-oic acid別名: 分子式: C20H30O4性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 三軸鳳尾蕨;貝殼杉烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
絲氨/蘇氨蛋白激酶DCAMKL1抗體ent-9-Hydroxy-15-oxokaur-16-en-19-oic acid別名: 分子式: C20H28O4性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 三軸鳳尾蕨;貝殼杉烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
唐氏綜合征粘附分子抗體Paniculoside II別名: 分子式: C26H40O9性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 貝殼杉烷;二萜苷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷脂磷酶HTPAP抗體Celaphanol A別名: 6,12,13-Trihydroxy-5,8,11,13-podocarpatraen-7-one分子式: C17H20O4性狀: Yellow powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 南蛇藤屬;羅漢松烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
穿膜蛋白DLK1抗體(C端)Nemoralisin別名: 分子式: C20H28O4性狀: Oil純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 陵水暗羅;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
二氫葉還原酶樣1抗體ent-9-Hydroxy-15-oxokaur-16-en-19-oic acid β-D-glucopyranosyl esr別名: 分子式: C26H38O9性狀: Powder純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 貝殼杉烷;二萜苷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
脫氧尿苷三磷酶DUT抗體2,16,19-Kauranetriol 2-O-β-D-allopyranoside別名: 分子式: C26H44O8性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 貝殼杉烷;二萜苷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
MTL小鼠胃動(dòng)素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理G氨基丁受體3抗體Monkey TDP43 (Tar DNA Binding Protein 43KDa )ELISA Kit
G氨基丁受體α3抗體Monkey GSTα1 (Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit
GEN1蛋白抗體Monkey PCIII (Procollagen III) ELISA Kit
谷氨酰胺磷核糖基焦磷酰胺基轉(zhuǎn)移酶Monkey LRP6 (Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein) ELISA Kit
α-半乳糖苷酶抗體Monkey NOX1 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) ELISA Kit
蛋白偶聯(lián)受體55抗體Monkey ACVA (Activin A) ELISA Kit
生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γMonkey SOD2 (Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial) ELISA Kit
生長(zhǎng)停滯特異性蛋白2家族3抗體Monkey C8b (Complement Component 8b) ELISA Kit
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