當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>小鼠ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TFbg小鼠血纖蛋白原ELISA試劑盒實驗原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | Fbg小鼠血纖蛋白原ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Mouse Fibrinogen, Fbg Elisa Kit |
貨號 | FS-M64373 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
膜蛋白Derlin抗體Diosbulbin J別名: 分子式: C19H22O8性狀: Powder純度: 96.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 黃獨;C-19降克羅烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
二脂酰甘油?;D(zhuǎn)移酶抗體Triptoquinone B別名: 19-Hydroxy-8,12-abietadiene-3,11,14-trione分子式: C20H26O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 昆明山海棠;雷公藤;松香烷;中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
轉(zhuǎn)錄因子DP1抗體Itol A別名: 分子式: C20H32O6性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 殺蟲劑;梔子皮;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
間粘附分子非整合素蛋白3抗體Diosbulbin G別名: 分子式: C19H22O6性狀: Powder純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 黃獨;C-19降克羅烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
DNA依賴性蛋白激酶抗體Hinokiol別名: 8,11,13-Abietatriene-3,12-diol分子式: C20H30O2性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 抗真菌;松香烷;中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化DNA依賴性蛋白激酶抗體2,6,16-Kauranetriol 2-O-β-D-allopyranoside別名: 分子式: C26H44O8性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 井口邊草;貝殼杉烷;二萜苷;中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化DNA依賴性蛋白激酶抗體Prisolic acid E別名: 分子式: C20H30O5性狀: Powder純度: 95.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 半邊旗;貝殼杉烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
蓬亂蛋白2抗體Galanolactone別名: 8,17-Epoxy-12-labden-16,15-olide分子式: C20H30O3性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 活性;紅豆蔻;姜;半日花烷;中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
Fbg小鼠血纖蛋白原ELISA試劑盒實驗原理3-磷甘油脫氫酶(兔來源免疫組化用抗體)Monkey EFNA4 (Ephrin A4) ELISA Kit
3-磷甘油脫氫酶單克隆抗體(內(nèi)參抗體)Monkey CKLFSF6 (Chemokine Like Factor Superfamily 6) ELISA Kit
生長停滯特異性蛋白2家族1抗體Monkey FABP4 (Fatty Acid-binding Protein 4, Adipocyte) ELISA Kit
G蛋白偶聯(lián)受體97抗體Monkey PAH (Phenylalanine Hydroxylase) ELISA Kit
G蛋白結(jié)合蛋白7抗體Monkey SBEM (Small Breast Epithelial Mucin) ELISA Kit
綠色熒光蛋白抗體Monkey GPLD1 (Glycosylphosphatidylinositol Specific Phospholipase D1) ELISA Kit
綠色熒光蛋白抗體Monkey AIRE (Autoimmune Regulator) ELISA Kit
G蛋白通路抑制蛋白1抗體Monkey NRG-1 (Neuregulin 1) ELISA Kit
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