當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>抑制劑激活劑>> DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)
貨號 | FS-X10333 |
---|
產(chǎn)品介紹:
英文名稱:DNA Ligase IV Inhibitor 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg SCR7是一種DNA連接酶IV(DNA Ligase IV)抑制劑,抑制非同源末端連接(NHEJ)。SCR7增強CRISPR/Cas9條件的編輯頻率。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1533426-72-0 純度:99.78% 分子量:334.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱:DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)
英文名稱:DNA Ligase IV Inhibitor
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
貨號:FS-X10333
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
諾爾斯氏鏈霉菌磷化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體Human NDRG4 前列腺D2(PGD2)
乳乳球菌乳亞種蛋白激MST抗體Human NDUFA5 前列腺A1(PGA1)
棘托竹蓀磷化蛋白激MST抗體Human NDUFA7 前列環(huán)(PGI2)
假蒼白桿菌磷化肌球蛋白輕鏈2抗體Human NDUFA8 前列環(huán)(PGI)
臭曲霉髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human NDUFA9 前顆粒蛋白(PGRN)
*枯草芽胞桿菌髓樣白血病-1抗體Human NDUFAF1 前膠原C內(nèi)肽增強子1(PCOLCE1)
球色單隔孢屬微管相關(guān)蛋白2抗體Human NDUFAF2 前膠原C端肽(PCP)
產(chǎn)短桿菌肌增強因子2B抗體Human NDUFAF4 前病整合位點1(Pim1)
孟氏假單胞菌心血管發(fā)育中胚層相關(guān)蛋白1抗體Human NDUFB11 前白蛋白(PA)
球形副球菌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白2抗體Human NDUFB1 普通急性淋巴白血病抗原(CALLA)
空腸彎曲桿菌MYC結(jié)合蛋白2抗體Human NDUFB10 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT4)
弗氏鏈霉菌精/脯富含卷曲蛋白1抗體Human NDFIP1 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3(GLUT3)
釀酒酵母微管相關(guān)蛋白9抗體Human NDUFB2 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)
產(chǎn)亞硝鹽馬杜拉放線菌有絲分裂驅(qū)動蛋白樣1抗體Human NDUFA4L2 葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)
雜色曲霉髓過氧化物抗中性粒胞質(zhì)IgG抗體Human HCRT(Orexin) 葡萄糖氧化(GOD)
波蘭青霉兔抗小鼠IgA抗體Human NCOA5 葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)
堅強芽胞桿菌Bacillus│firmus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR番瀉B
噬冷菌(加詞待譯)Algoriphagus│zhangzhouensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR番瀉A
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR和厚樸
DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)芹側(cè)耳 2,4-二乙催產(chǎn)
大腸埃希氏○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○128 2-基-N-甲基乙酰催乳
植物乳桿 十氫異喹啉大內(nèi)皮
白僵 三氟甲磺鐵(III)單氧化
擬木荷生德克斯酵母 6-溴-1-四氫萘酮單氧化B
小小鏈霉(微小鏈霉) 5-硝基香草單核趨化蛋白1
短芽孢桿 4-氨基喹哪啶膽固
孢吸水鏈霉北京變種 L-天門冬二芐酯鹽鹽膽固7α羥化
竹黃* 叔丁基苯基碳酯膽固酯
異常威克漢姆酵母 5--2-甲膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白
金灰青霉 (R)-3,3-二甲基-2-丁膽紅
大腸埃希氏 4-甲基芐脒鹽鹽乙酰轉(zhuǎn)移
魚蛉假絲酵母 2-乙氧基苯甲酯
解淀粉堿單胞 2--4-頻哪酯膽
立枯絲核 二甲基烯1,6-己二酯彈性蛋白
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責,儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。