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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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Hsp90抑制劑(AT13387)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-23 14:20:04瀏覽次數(shù):143次

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貨號(hào) FS-X10782
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Human C-Peptide ELISA Kit 人C肽羅丹明B ,>99.0% (HPLC)
HCG(Human Chorionic Gonadotrophin) ELISA Kit 人絨毛膜促性腺激紅熒烯 99%
Beta-CG(H

中文名稱:Hsp90抑制劑(AT13387)

英文名稱:AT13387

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號(hào):FS-X10782

產(chǎn)品介紹:

AT13387是Hsp90抑制劑,對(duì)A375細(xì)胞的IC50為18nM,具有長效的抗腫瘤活性。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號(hào):912999-49-6

別名:Onalespib

純度:99.64%

分子量:409.52

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

大腸埃希氏菌兔子堿性成纖維生長因子Anti-LDLRAD3 Antibody人型肝炎IgG(HCV-IgG)

Marella suaedae人結(jié)締組織活化肽ⅢAnti-LGALS2 Antibody人型肝炎IgG(HCV-IgG)

玫瑰小雙孢菌大鼠白介7Anti-LEF1 Antibody人糖蛋白130(gp130)

釀酒酵母人巨噬集落激因子受體Anti-LEFTY1 Antibody人糖蛋白130(gp130)

金黃回旋鏈霉菌兔子前列腺E2Anti-LFNG Antibody人促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)

熱紫鏈霉菌不滲透亞種魚促卵泡Anti-LFNG Antibody人促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)

核桃殼囊孢菌小鼠β-防御Anti-LGALS7 Antibody人去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓(dDAVP)

多形布勒擔(dān)子酵母凋亡原位(我公提供代測服務(wù))Anti-LGALS8 Antibody人去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓(dDAVP)

香菇(L988)大鼠絲/蘇蛋白磷Anti-LGALS9 Antibody人蕈堿型乙酰受體亞型M3(M-AChR M3)

地衣芽孢桿菌魚促黃體激Anti-LHCGR Antibody人蕈堿型乙酰受體亞型M3(M-AChR M3)

盤長孢狀盤孢小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽Anti-LIG3 Antibody人睪受體(TR)

蠟蚧菌A Fc段受體ⅠAnti-LILRA1 Antibody人睪受體(TR)

IBV M41 HAR/HI serum 陽性血清(荷蘭引進(jìn))兔子5羥色Anti-LIG4 Antibody人蕈堿型乙酰受體(M-AChR)

間型串珠鐮孢兔子β內(nèi)啡肽Anti-LILRA2 Antibody人蕈堿型乙酰受體(M-AChR)

昆明鏈霉菌小鼠神經(jīng)絲蛋白Anti-LILRA4 Antibody人糖蛋白49A(Gp49a)

蘇云金芽孢桿菌蘇云金亞種魚磷化腺活化蛋白激Anti-LILRA5 Antibody人糖蛋白49A(Gp49a)

結(jié)合蛋白1抗體克魯斯假絲酵母小鼠肺腺癌細(xì)胞系

環(huán)指蛋白5抗體E3泛蛋白連接RNF5綠色鏈霉菌人肺癌細(xì)胞

核糖體蛋白L15抗體地生翅孢殼昆蟲細(xì)胞

核糖體蛋白L19抗體奇異翅孢殼鼠黑色瘤細(xì)胞
Hsp90抑制劑(AT13387)紫云英根瘤 Stuart運(yùn)送培養(yǎng)基管松弛

宇佐美曲霉 安息香二甲(DMPA)髓過氧化物

凍膠假絲酵母 Amies運(yùn)送培養(yǎng)基管髓磷脂堿性蛋白

柔嫩艾美耳球蟲 瓷珠種保存管(20支)髓鞘堿性蛋白抗體

枯草芽孢桿 瓷珠種保存管(50支)胎盤生長因子

羅倫隱球酵母羅倫變種 PH6.8磷鹽緩沖液糖聚糖

空腸彎曲桿 6-甲基-1-茚酮天冬蛋白

大腸埃希氏桿 PH7.0的NaCl蛋白胨緩沖液天門冬氨基轉(zhuǎn)移

大腸埃希氏桿 0.1%蛋白胨水同型半胱

芽枝狀枝孢 含200ml鹽水均質(zhì)袋透明質(zhì)

弗雷德里克斯堡假單胞 含200ml鹽水均質(zhì)袋晚期糖基化終末產(chǎn)物受體

拉曼被孢霉 L-苯芐酯鹽鹽胃泌

南方散斑殼 含225ml布氏肉湯均質(zhì)袋間粘附分子1

長枝木霉 含22%胰酪胨大豆肉湯均質(zhì)袋細(xì)脂蛋白

腸桿 含50ml7.5%肉湯均質(zhì)袋纖連蛋白

 


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