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貨號 | FS-X10858 |
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中文名稱:芳香酶抑制劑(Anastrozole)
英文名稱:Anastrozole
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
貨號:FS-X10858
產(chǎn)品介紹:
Anastrozole是一種選擇性的芳香酶(aromatase)抑制劑,抑制胎盤芳香化酶,IC50為15nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:120511-73-1 別名:ZD1033 純度:99.79% 分子量:293.37 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
解淀粉芽孢桿菌人Ⅰ型膠原C端肽Anti-PSer Histone H3 Antibody人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因
pET-22(b) 大鼠脂蛋白磷脂A2Anti-PSMD11 Antibody人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因
玫煙色棒束孢小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體-3Anti-PSMD3 Antibody人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)
總狀共頭霉人粘蛋白/粘液5ACAnti-PSMD12 Antibody人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)
茶藨子葡萄座腔菌大鼠熱休克蛋白90Anti-PSMD6 Antibody人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)
短小芽孢桿菌人轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)Anti-PSMD3 Antibody人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)
奇異變形菌大鼠熱休克蛋白70Anti-PTEN Antibody人α1β糖蛋白(α1β-GP)
雙生柱孢(三七黃腐病菌)小鼠補(bǔ)體蛋白4Anti-PTGES3 Antibody人α1β糖蛋白(α1β-GP)
粘孢白僵菌小鼠腎Anti-PTGDR2 Antibody人可溶性髓系觸發(fā)受體-1(sTREM-1)
挪威脫硫微菌大鼠熱休克蛋白40Anti-PTGDR Antibody人可溶性髓系觸發(fā)受體-1(sTREM-1)
終腐霉人天門冬轉(zhuǎn)/谷草轉(zhuǎn)Anti-PTGFRN Antibody人肌抑(MSTN)
地衣芽孢桿菌大鼠熱休克蛋白20Anti-PTGIS Antibody人肌抑(MSTN)
大腸埃希菌人肝脂Anti-PTGS2 Antibody人黑瘤衍生亮拉鏈額外核因子(MLZE)
秦氏蜜環(huán)菌小鼠α2抗纖溶Anti-PTH Antibody人黑瘤衍生亮拉鏈額外核因子(MLZE)
食爬蟲假單胞菌小鼠α2纖溶抑制物Anti-PTGR2 Antibody人二磷尿核葡糖基轉(zhuǎn)移2家族肽B4(UGT2B4)
杰氏假單胞菌人乙酰肝Anti-PTH2 Antibody人二磷尿核葡糖基轉(zhuǎn)移2家族肽B4(UGT2B4)
微管蛋白特定伴侶蛋白E抗體粘鞭霉小鼠骨髓來源樹突狀細(xì)胞
Tudor結(jié)構(gòu)域蛋白TDRD3抗體榆黃蘑人舌鱗狀上皮細(xì)胞癌
線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位8A/耳聾/肌張力障礙肽抗體山茶大鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞
跨膜蛋白158抗體金黃殼囊孢人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)
芳香酶抑制劑(Anastrozole)嗜果刀孢 4-吡啶促肝生長
腸膜明串珠 3-溴苯甲胰淀粉
Cellulomonas carbonis 3-溴苯甲胰脂肪
黃暗青霉 3-氟鄰苯二甲胸膜肺炎放線ApxⅣA抗體
釀酒酵母 2,4-二氟弓形體抗體
紡錘形毛殼 2,3-二羥基喹喔啉傳染性胃腸炎病
平田頭菇-3 1H-苯并咪唑-5-羧乙型腦炎病
大腸埃希氏 2-甲基-4-戊烯傳染性胸膜肺炎
圍小叢殼 臘樣芽孢桿選擇瓊脂基礎(chǔ)副豬嗜血桿抗體
斯氏普羅威登斯 5-戊酰流感抗體
華根霉 葡萄糖酪胨瓊脂支原體肺炎抗體
耐熱拉錢斯氏酵母 動力-硝鹽培養(yǎng)基細(xì)小病抗體
香菇 含鐵牛奶培養(yǎng)基口蹄疫O型抗體
枯草芽孢桿枯草亞種 2-基乙酯口蹄疫感染抗體
微球 1%NaCl蔗糖口蹄疫病VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體
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