操作步驟：

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

糙皮側(cè)耳Escherichia coli大鼠磷化外信號調(diào)節(jié)激(pERK)

兩形頭曲霉Escherichia coli大鼠組織蛋白K(cath-K)

秦氏蜜環(huán)菌Escherichia coli大鼠組織蛋白K(cath-K)

根瘤菌Escherichia coli大鼠巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)

產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型Escherichia coli大鼠巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)

威爾氏李斯特菌Escherichia coli大鼠骨形成蛋白(BMPs)

大腸埃希菌Escherichia coli大鼠骨形成蛋白(BMPs)

枯草芽孢桿菌Escherichia coli大鼠視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)

香菇Escherichia hermannii大鼠視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)

三孢布拉霉Escherichia coli大鼠6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)

白地霉Escherichia hermannii大鼠6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)

副豬嗜血桿菌Escherichia sp.大鼠戊糖(Pentosidine)

褐紅小孔菌Escherichia sp.大鼠戊糖(Pentosidine)

蘇云金芽胞桿菌勵木亞種Escherichia sp.大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)

淡紫擬青霉Escherichia sp.大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)

巴西果小克銀漢霉Escherichia sp.大鼠中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)

核磷化抗體尖孢鐮刀菌EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞

早老蛋白1+2抗體布氏正青霉SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞

磷化絲/蘇抗體芽枝霉菌人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞

端粒抑制因子PinX-1抗體克羅德巴利酵母人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞
TOPK抑制劑(OTS514)綠僵 二氫齒孔

禿裸鏈霉 堿性氧化鋁

納瓦河部落奇異球 多孔C

白僵 聚乙二20000

泡囊側(cè)耳 3-表去氫茯苓

絨蓋干酪 去甲白屈菜紅堿

痰塔特姆氏 聚乙二000

葡糖桿屬 O-乙酰五味子酯L

淡藍(lán)褐糖絲 聚乙二8000

舒青霉 安五

草菇 異性南五味子; 異南五味子 C

孟氏假單胞 聚乙二6000

球紅酵母 南五味子木脂N

釀酒酵母 聚乙二4000

釀酒酵母 五脂酮D