產(chǎn)品介紹:

中文名稱：ROCK-II/PKA/PKG/PKC/MLCK抑制劑

英文名稱：Fasudil Hydrochloride

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg

貨號(hào)：FS-X10554

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

土生類諾卡氏菌Wnt信號(hào)受體蛋白抗體Anti-MIF Antibody(PB0314)親核α3(KPNα3)

葡萄糖桿菌屬富含脯同源蛋白1抗體Anti-MIF Antibody親核α2(KPNα2)

桔青霉原癌基因WIP1抗體Anti-MitoNEET/CISD1 Antibody親核α1(KPNα1)

黃色單胞菌信號(hào)通路Wnt2B抗體Anti-MIP Antibody鞘磷脂脂質(zhì)蛋白1(PLP1)

美澳型核果褐腐病菌WEE1蛋白抗體Anti-MKP-1/DUSP1 Antibody鞘磷脂磷二酯4(SMPD4)

釀酒酵母WRCH1抗體Anti-MKI67 Antibody(PB0065)鞘磷脂磷二酯3(SMPD3)

Glarea lozoyensis絲/蘇激家族成員的基因WNK3抗體Anti-MLC1 Antibody鞘磷脂合2(SGMS2)

釀酒酵母信號(hào)通路Wnt9a抗體Anti-MLH1 Antibody鞘磷脂合1(SGMS1)

紫產(chǎn)色鏈孢囊菌Wnt1信號(hào)通路蛋白1抗體Anti-MLH1 Antibody鞘磷脂蛋白0(MPZ)

鑲邊鏈霉菌WASP結(jié)合蛋白抗體Anti-MME Antibody(PB0026)鞘磷脂(SPH)

大腸桿菌屬野生型P53誘導(dǎo)基因1抗體Anti-MMP1 Antibody鞘激2(SPHK2)

沼澤微桿菌Verprolin同源結(jié)構(gòu)域包含蛋白3抗體Anti-MMP1 Antibody鞘激1(SPHK1)

吸水鏈霉菌灰色變種信號(hào)通路Wnt11抗體Anti-MMP1 Antibody鞘1磷酯受體1(S1PR1)

飲料  亮藍(lán)、紅信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白WD重復(fù)蛋白2抗體Anti-MMP10 Antibody鞘-1-磷磷1(SGPP1)

福氏嗜冷桿菌WW結(jié)構(gòu)域E3泛連接1抗體Anti-MMP11 Antibody橋尾蛋白(GPHN)

橄欖假絲酵母WD重復(fù)蛋白16抗體Anti-MMP11 Antibody橋連整合因子3(BIN3)

突觸泡蛋白2A抗體湯卜遜沙門氏菌人皮膚MatchPair™:皮膚表皮角質(zhì)形成細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞

長(zhǎng)鏈脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體山夫頓堡沙門氏菌人前列腺M(fèi)atchPair™:前列腺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞

轉(zhuǎn)錄抑制蛋白Sin3b抗體型副傷門氏菌人乳腺M(fèi)atchPair™:乳腺上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞

相關(guān)蛋白16抗體多主枝孢霉人腎MatchPair™:腎上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞
ROCK-II/PKA/PKG/PKC/MLCK抑制劑大腸埃希 (S)-1-(二苯基膦基)-2-[(S)-4-異基惡唑啉-2-基]二茂鐵胃蛋白

玫瑰庫(kù)克氏 二(4-溴苯基)胰淀粉

杰丁畢赤酵母 4-溴-2,6-二氟苯甲胰脂肪

季也蒙有孢漢遜酵母 2,4-二苯磺酰P27蛋白

異常威克漢姆酵母 1-金剛烷乙睛脂多糖結(jié)合蛋白

蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 N-Fmoc-N'-Boc-L-2,3-二氨基可溶性CD14

費(fèi)雷生枝霉 Salirasib腸脂肪結(jié)合蛋白

乳酒假絲酵母 4-苯氧基苯磺酰超敏C反應(yīng)蛋白

大腸埃希氏桿 鹽芬戈莫德膽固?；D(zhuǎn)移

抗生鏈霉 (S)-(+)-1-[(R)-2-(二苯基膦)二茂鐵]乙基二環(huán)已基膦緊密連接蛋白

糞腸球 3,5-二叔丁基緊密連接蛋白1

尖孢鐮刀 2,6-二氟苯結(jié)合珠蛋白

阪崎腸桿 2-基-6-硫氧還蛋白還原

苜蓿中華根瘤 Rofecoxib核因子κB受體活化因子配基

*擬蛹蟲(chóng)草 3'--2'-氟苯乙酮蛋白激R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激