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貨號 | FS-X10557 |
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中文名稱:BET家族抑制劑(Mivebresib)
英文名稱:Mivebresib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10557
產(chǎn)品介紹:
Mivebresib是BET家族的抑制劑,能夠擾亂關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄程序在體內(nèi)或者體外推動(dòng)前列腺癌增長引起強(qiáng)的抗腫瘤特性,也是MYC和TMPRSS2-ETS的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1445993-26-9 別名:ABBV-075 純度:99.28% 分子量:459.47 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
伯氏致病桿菌軟骨蛋白39抗體Anti-MMUT Antibody前列腺轉(zhuǎn)谷酰(TGM4)
枯草芽孢桿菌肝癌相關(guān)蛋白2抗體(轉(zhuǎn)錄因子YY1結(jié)合蛋白1抗體)Anti-MOG Antibody前列腺抑制肽(PIP)
澳大利亞平臍蠕孢核敏感元件結(jié)合蛋白1Anti-MORC3 Antibody前列腺性磷(ACP3)
叢赤殼y-盒結(jié)合蛋白1抗體Anti-Motilin(MLN) Antibody前列腺還原2(PTGR2)
大腸埃希氏桿菌原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體Anti-MNAT1 Antibody前列腺還原1(PTGR1)
釀酒酵母磷化DNA結(jié)合蛋白B抗體Anti-MNT Antibody前列腺I合(PTGIS)
小單孢菌磷化原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體Anti-MPG Antibody前列腺F受體(FP)
Prauserella核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子YY1抗體Anti-MPO Antibody前列腺E受體3(EP3)
蠟狀芽孢桿菌磷化原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體Anti-MPI Antibody前列腺E受體2(EP2)
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;驮┗蚶业鞍准?/span>Yes1抗體Anti-MPO Antibody前列腺E合2(PTGES2)
少根根霉磷化原癌基因酪蛋白激Yes1抗體Anti-MPO Antibody(PB0072)前列腺E合(PTGES)
欽海特德沃斯氏菌磷化原癌基因酪蛋白激Yes1抗體Anti-MPZ Antibody前列腺D合(PTGDS)
谷棒桿菌磷化zeta相關(guān)蛋白70抗體Anti-MPP2 Antibody前列腺D2合成(PGD2S)
包圍漆斑菌磷化zeta相關(guān)蛋白70抗體Anti-MRC1 Antibody前列腺六跨膜表皮抗原2(STEAP2)
巨大球菌屬磷化斑聯(lián)蛋白抗體Anti-MR1 Antibody前列腺干抗原(PSCA)
康氏假單胞菌鋅指蛋白924抗體Anti-MPP1 Antibody前列腺凋亡應(yīng)答因子4(PAR4)
剪接因子,精/絲豐富19Sphingomonasoligoaromativorans人卵巢癌組織源細(xì)胞
轉(zhuǎn)錄因子SOX-11蛋白抗體Sphingomonasmolluscorum人膽道癌組織源細(xì)胞
單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3/4抗體Acinetobacterradioresistens人腎癌組織源細(xì)胞
軸突生長因子CD108抗體腦膜膿毒性金黃桿菌人膀胱癌組織源細(xì)胞
BET家族抑制劑(Mivebresib)鮑姆木層孔 3-羥基磺(含有數(shù)量不等的3,3'-氧基二烷磺)(約的水溶液,約7.8mol/L)一磷腺
根霉 6-芐氧基L苯解氨
假單胞屬 N-Boc-D-色氨瘤病16型L1
瓦尼針層孔 2,3-二苯基哌三葉因子
冷溫木拉克酵母 硝鐠(III)六水合物巴氏桿
放射形根瘤 (S)-哌-2-羧超氧化物歧化
芬尼青霉 2,5-二溴-3-硝基吡啶過氧化氫
棒曲霉 5-溴-2-羥基-3-硝基吡啶敏感性脂肪
雅致放射毛霉 3-溴-5-硝基吡啶神經(jīng)
大豆慢生根瘤 6-基磷脂A1
枝孢霉 2--6-甲氧基吡啶-4-羧磷脂A2
貪噬屬 1-Boc-4-溴甲基磷脂C
卷枝毛霉 2,2-二氟-1,3-苯并二惡茂脂肪甘油三酯脂
黃色短桿* 3-四甲二酰甘油磷轉(zhuǎn)移
解淀粉芽孢桿 4-氨基-3--5-甲溶血酰基轉(zhuǎn)移
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